纳米粒子纳米颗粒是指尺寸在1到100纳米之间的颗粒。由于它们的小尺寸,纳米粒子通常用于不同类型的细胞和组织的荧光成像。当今生物成像中常用的一些纳米材料包括碳点、贵金属纳米颗粒、聚合物点、量子点和荧光掺杂二氧化硅等。在成像中,与其他分子荧光团和探针相比,纳米颗粒/纳米材料具有多种优势,使其成为理想的选择。除了提高亮度外,纳米粒子是惰性的并且往往分布均匀,这有助于在成像过程中获得更好的结果。此外,与各种分子荧光团相比,纳米颗粒和纳米材料没有细胞毒性,并且不受非特异性结合问题的影响。由于这些特性,大多数荧光纳米颗粒(染色纳米颗粒)可以内化到细胞/组织中,并容易靶向给定部位。D-荧光素钾盐南京星叶生物科技有限公司。生物发光荧光染料激发
InvitrogenCy3染料是一种明亮的橙色荧光染料,可使用532nm激光线激发,并使用TRITC(四甲基罗丹明)滤光片组进行可视化。除了免疫细胞化学应用,Cy3染料通常用于标记核酸。发光说明:Cy3荧光团也是亲脂性神经元和长期DiI细胞追踪试剂的基础,该试剂添加烷基尾(≥12个碳)添加到**荧光团上。Cy3染料是用于成像、流式细胞术和基因组应用的蛋白质和核酸结合物的传统橙色荧光标签。它也是经典亲脂性示踪剂DiI及其变体的基础。根据化学结构,Cy3可分为普通Cy3(常简称Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性较低,在水相标记反应时常常需要使用有机共溶剂,常用有机溶剂包括DMF,DMSO和乙腈等。磺化Cy3是在Cy3的结构基础上磺化的产物,附带2个或3个磺酸根离子。由于磺化效应,磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮,荧光稳定性也提高,可赖受更长时间的曝光。磺化Cy3水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。当然,磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。外泌体荧光染料蓝色荧光素的衍生物包括异硫氰酸荧光素、俄勒冈绿和羧基萘并荧光素等。
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,电泳级)储存条件及注意事项4℃避光可保存12个月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特点●无毒性:属花菁类染料,容易生物降解,无致*毒性。●灵敏度高:至少可检出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍。●信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。●操作简单:无须脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。●适用范围广:可适用于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。●使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。●经济:价格比银染便宜。
本质上,有机染料的特征在于源自在整个生色团上离域的光学跃迁或源自分子间电荷转移跃迁(从激发电子态的分子内电荷转移)的发射。在这里,表现出源自在整个生色团上离域的光学跃迁的发射的染料被称为共振染料(介观染料),而后者被称为CT染料(电荷转移染料)。花青、罗丹明和荧光素是一些最常见的共振染料,其特点是窄的吸收和发射带(略微结构化),往往相互镜像,以及小的、对溶剂极性不敏感的斯托克斯位移。另一方面,CT染料包括香豆素和丹磺酰荧光团等染料,其特点是与共振染料相比,吸收和发射带结构无结构,分离良好,以及更大的斯托克斯位移。同样,与共振染料相比,CT染料具有更小的摩尔吸收系数和荧光量子产率。对于共振和CT荧光染料,在结构-性质关系众所周知的情况下,可以通过精心设计的策略来微调光谱性质。目前常用标记蛋白/抗体的荧光素主要有BODIPY类、香豆素类、罗丹明类、近红外类、NBD胺类以及菁染料等。
Cy3 (Cyanine 3) 是一种发橘黄色荧光的花青素荧光染料。Cy3染料的激发峰和发射峰分别在550 nm和570 nm左右,它的荧光肉眼观察很明亮,并且对pH不敏感,在共聚焦显微镜中可以用532nm(肩峰)或者556nm(顶峰)的激光束激发,在普通荧光显微镜中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察,所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。Cy3也是Dil等细胞电位追踪剂的母核,所以它是在生物技术中非常有用的荧光染料。在荧光成像时,Cy3的背景荧光一般认为比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用来标记蛋白,抗体,多肽等,它常见的使用是标记核酸分子(DNA和RNA)。基于荧光图谱的相似性,Cy3可以被TAMRA,TRITC, BODIPY TMR等染料替代,在需要更明亮,更稳定的替代物时,可以考虑使用AF547或者AF555等。小动物成像荧光染料能够选择性地与目标细胞或组织结合。山东荧光染料激发
Cy5.5含有一个游离胺基,可与多种官能团共轭,包括NHS酯和环氧化合物。生物发光荧光染料激发
荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、**基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记**常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻红蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。生物发光荧光染料激发