HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可比较基础的病理染色HE染色。江西值得信赖的HE染色价格
HE染色反蓝的原理：苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色，称蓝化作用，一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水比较好）变蓝。江西值得信赖的HE染色价格专业的HE染色服务平台，南京英瀚斯生物。
HE染色观察肝脏HE染色切片，首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜，调准焦螺旋至视野清晰，可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少，小叶分隔不明显，但动物如猪或小鼠，其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉，在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列，称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下，肝细胞内染色为蓝色的是细胞核，细胞核大而圆，居中，异染色质少而着色浅，能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富，多成嗜酸性，当蛋白质合成旺盛时，胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网，等等，但是在光镜下是无法看到的，需要在电镜下才能观察到。当然，肝小叶内除了肝细胞，还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态，但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整，以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。
HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。脾脏组织HE染色如何观察。
HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理，样品处理：a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。c对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。HE染色结果如何分析和读片？重庆HE染色报告
比较常见的病理染色HE染色？江西值得信赖的HE染色价格
HE染色常见问题：切片染色不均匀，有片状的弱着**存在答：（1）取材时组织太厚，固定过久，导致深部组织固定不佳，而表浅组织过度固定，而透明、脱水、浸蜡均是如此，这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。（2）制片过程有问题，切片厚薄不一，或者有刀痕，或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一，一般都是在制片时，刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳（一般比较好角度为5°）（3）脱蜡前未烘烤，脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久，导致脱蜡不彻底。（4）染色液过少，着色不均匀；或染色时部分组织干涸而另一部分湿润，这样会导致组织吸附染料的能力不一。（5）分化不当。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。江西值得信赖的HE染色价格
