第二种***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化学公司HoechstAG生产。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是邻苯二甲酰亚胺,具有向A-T富集区插入的趋势,因此后者不常使用。与DAPI相似,此类染料受到紫外线激发并在455nm下发射比较大值,在无结合状态下变为510–540nm。Hoechst染料还具有细胞渗透作用,因此可用于固定细胞和活细胞。与DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色剂碘化丙啶无法透过细胞膜。在细胞培养中,因为该染色剂无法进入完好的细胞内,所以常常被用来区分活细胞和死细胞。碘化丙啶也是一种结合剂,但对不同的碱基没有特异性。在核酸结合态下,其比较大激发波长为538nm,比较高发射波长为617nm。未结合状态下碘化丙啶的比较大激发和发射被移到较短的波长和较弱的强度。它也可以在不改变其荧光特性的情况下与RNA结合。要区分DNA和RNA,必须使用足够的聚合酶。脂溶性荧光染料cy3、cy5、cy7等。苏州荧光染料Fluor 488
在荧光显微术中,不仅蛋白质结构感兴趣,而且对核酸也感兴趣。有时有必要通过检测细胞核来确定细胞的确切位置或数量。最常见的DNA染色剂之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要与DNA双螺旋富含A-T的区域结合。与未结合态相比,DAPI在DNA上的荧光强度增加。染料被UV(紫外线)光激发,比较大激发波长为358nm。发射光谱较宽,峰值在461nm。弱荧光也可以检测到RNA结合。在这种情况下,发射转移到500nm。有趣的是,DAPI能够渗透完整的细胞膜。因此,该染料既可用于固定细胞也可用于活细胞。显微镜荧光染料荧光素钾盐吲哚菁绿在生物识别和药物输送方面也有广泛的应用。
除了以上应用,吲哚菁绿还可以用于生物识别和药物输送。在生物识别中,吲哚菁绿可以与特定的生物分子结合,从而实现对这些分子的检测和定量分析。这项技术在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用前景。此外,吲哚菁绿还可以作为药物输送系统的一部分,将药物包裹在其分子结构中,通过近红外光***释放药物,实现靶向***。吲哚菁绿作为一种多功能的荧光染料,在医学和生物领域具有广泛的应用前景。其绿色溶解度的优良性能,使其能够在水溶液中快速溶解,为其在医学影像学、光热***、生物识别和药物输送等方面的应用奠定了基础。随着科学技术的不断进步,相信吲哚菁绿在未来将发挥更大的潜力,为人类健康事业做出更大的贡献。吲哚菁绿作为一种荧光染料,在医学影像学中的应用是**为突出的。它可以通过静脉注射进入人体血液循环系统,并在近红外激光的照射下发出荧光信号。这种荧光信号可以被**的显像设备捕获和记录,从而形成高分辨率、高对比度的影像。这样的影像可以帮助医生观察和分析血管、淋巴系统以及**等病变的情况,提供重要的诊断依据。
蛋白荧光标记技术是目前**为常见的蛋白体外标记技术,利用级联放大反应原理,将极度敏感性且易于检测的荧光素通过某个基团吸附或共价结合后,标记到特异性抗原或抗体分子上,应用荧光显微镜观察荧光标记物因增强放大效应而产生颜色、光谱等变化,以分析示踪相应抗体或抗原性质与含量的方法。该技术在具有高度精确性的荧光显微镜下,借助高度灵敏性的荧光检测,在各种生物过程中对目的蛋白进行可视化,从而通过抗原抗体高度特异性免疫定量表达或在细胞研究中定位。蛋白荧光标记已成为研究蛋白质互作、酶活性、***示踪以及细胞分选重要工具。蛋白标记常用荧光染料随着蛋白荧光标记技术不断发展,各类荧光素广泛应用于生物实验中,目前常用标记蛋白/抗体的荧光素主要有BODIPY类、香豆素类、罗丹明类、近红外类、NBD胺类以及菁染料等。南京星叶生物科技有限公司提供多种性价比高的各类活化荧光素,其荧光染料覆盖波长范围从350nm到790nm,例如Cy系列、SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)等,用于标记抗体、多肽以及蛋白功能基团,继而生成分子探针,通过荧光成像进行相应检测。荧光素衍生物具有高吸收率优异的荧光量子产率和良好的水溶性是流式细胞仪和免疫荧光中常用的荧光标记之一。
Cy7DiC18(DiR)是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。Cy7DiC18(DiR)的两个18-碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。Cy7DiC18(DiR)(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。Cy7DiC18(DiR)染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1%TritonX-100透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
1、Cy7DiC18(DiR)染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 南京星叶生物提供多种性价比高的各类活化荧光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。苏州荧光染料Fluor 488
Cy3染料的激发峰和发射峰分别在550 nm和570 nm左右。苏州荧光染料Fluor 488
其他细胞结构常用染料生物染料在细胞结构和组分鉴定中有着广泛的应用,除细胞膜研究外,我们经常也会对一些其它细胞结构及成分进行探索,例如线粒体、溶酶体、蛋白质、细胞核等,而对于不同的细胞结构有不同的染料进行染色细胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于细胞核染色,可将细胞核染成蓝色。鬼笔环肽(Phalloidin)是细胞骨架的染色神器,罗丹明标记的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可将细胞染成橙红色,DAPI与Phalloidin染色液是研究细胞形态变化时经常用到的两种共染的试剂,染色效果可见A1-E1用TRITC-鬼笔环肽(橙红)染色的细胞骨架免疫荧光图;A2-E2用DAPI(蓝色)染色的细胞核免疫荧光图;A3-E3合并的L929细胞免疫荧光染色图。是S100A16过表达或下调前后PDAC细胞形态的变化。苏州荧光染料Fluor 488