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广州细胞培养支原体预防试剂

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种，以下是一些常用的检测手段： 1. 显微镜检测：通过相差显微镜观...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种，以下是一些常用的检测手段：

1. 显微镜检测：通过相差显微镜观察细胞，支原体在细胞表面和细胞之间会呈现为暗色微小颗粒。

2. 荧光染色法：使用荧光染料Hoechst 33258与DNA特异性结合，使支原体的DNA着色，然后在荧光显微镜下观察。染色后的支原体会在细胞周围或附于细胞膜表面显示为亮绿色小点。

3. 电镜检查：使用扫描电镜或透射电镜观察，这是一种简便快速的方法。

4. 聚合酶链反应（PCR）：使用特定的引物对支原体DNA进行扩增，是一种高灵敏度的检测方法。

5. 等温扩增法：基于LAMP技术，室温反应后观察颜色变化确认是否有支原体污染。

如何检测新鲜的培养基是否有支原体污染？广州细胞培养支原体预防试剂

支原体预防的实验步骤主要包括以下几个方面：

1. 无菌操作技术：在细胞培养过程中，严格遵守无菌操作规程，包括穿戴适当的实验服、手套，使用无菌工具和耗材。

2. 环境控制：保持实验室环境清洁，定期消毒工作台和实验室表面，使用层流罩或生物安全柜进行细胞操作。

3. 细胞培养基和试剂的无菌过滤：所有加入到细胞培养基中的试剂和补充物，如血清、抗*素等，都应通过无菌过滤以去除支原体。

4. 细胞培养基和试剂的检测：在添加到细胞培养物之前，对新的细胞培养基和试剂进行支原体检测，以确保它们没有被污染。

5. 定期检测：即使采取了预防措施，也应定期对细胞培养物进行支原体检测，以确保及时发现并处理潜在的污染。

6. 避免交叉污染：避免从一个细胞培养物到另一个的交叉污染，使用的移液器和工具，避免在不同细胞培养物之间重复使用。

7. 细胞培养物的筛选：使用已知无支原体污染的细胞株进行实验，或者在开始实验前对细胞株进行筛选。

8. 使用预防性试剂：在某些情况下，可以在细胞培养过程中添加特定的预防性试剂，如支原体预防剂，以降低污染风险。

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需要定期检测支原体污染的客户主要包括以下几类：

1. 生物医药企业：生产涉及细胞培养的生物制品的公司，包括疫苗、生物药物、基因产品等。

2. 细胞公司：进行细胞产品的研发和生产的企业，需要确保所用细胞的安全性和有效性。

3. 科研机构：从事细胞生物学、分子生物学、遗传学等研究的学术机构，需要保证实验结果的准确性。

4. 临床单位：使用细胞技术进行的医院或诊所，需要确保用细胞的质量。

5. 细胞库：保存和供应细胞株的细胞库，需要对细胞资源进行定期检测以保证其无污染。

6. 生物技术公司：提供生物技术服务的公司，如细胞培养、基因编辑等，需要确保服务过程中细胞的质量。

支原体污染是细胞培养中普遍的问题之一，细胞库中或正在使用的细胞中，支原体的污染率约为15%-35%。并对培养细胞的生理和代谢造成诸多影响：

01/ 争夺营养：支原体的污染会阻碍细胞生长和增殖

02/ 改变蛋白质、RNA 或 DNA 合成的水平

03/ 改变基因表达、细胞信号传导和形态

04/ 损害膜和细胞器

05/ 导致突变和染色体变化

06/ 时间、金钱和有价值的细胞丢失：支原体的污染会导致严重的经济损失以及研究时间损失

07/ 实验结果的不可靠性

08/ 生物安全问题

细胞培养中支原体污染的后果？

预防细胞培养过程中的支原体污染至关重要，因为一旦发生污染，可能会严重影响实验结果和细胞的生长。以下是一些有效的预防措施：

1. 无菌操作：始终在无菌条件下进行细胞培养操作，包括使用无菌的移液器、手套和其他实验室器材。

2. 个人防护：穿戴适当的个人防护装备，如实验服、手套和口罩，以减少污染的风险。

3. 细胞培养室的清洁：保持实验室和细胞培养室的清洁，定期进行消毒处理。

4. 培养箱的维护：定期清洁和消毒CO2培养箱，避免飞溅和溢出，并维持严格的清洁计划。

5. 使用无支原体污染的试剂：使用经过检测确认无支原体污染的培养基、血清和其他添加物。

6. 细胞的检测：定期对细胞进行支原体污染的检测，尤其是在引入新的细胞系或传代细胞之前。

7. 培养基和试剂的过滤：使用0.22μm或更小孔径的滤膜过滤所有细胞培养用液体，以阻止支原体的通过。

8. 使用抗*素预防：虽然抗*素不能作为常规预防手段，但在某些情况下，可以考虑使用抗*素作为预防措施，尤其是在高风险操作中。

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支原体检测实验的方法？广州细胞培养支原体预防试剂

在科研中，支原体检测是确保细胞培养纯净性的重要环节。以下是一些在科研中常见的支原体检测方法：

1. 支原体培养法：这是一种传统的检测方法，通过将细胞培养物接种到特定的培养基中，观察是否有支原体生长。这是直接的检测方法，但耗时较长，通常需要数周时间。

2. DNA染色法：使用荧光染料（如Hoechst或DAPI）染色细胞核，然后通过荧光显微镜观察。这种方法操作简便，可以快速得到结果，但特异性不高，可能会有假阳性。

3. 聚合酶链反应（PCR）法：这是一种分子生物学技术，通过设计特异性的引物，扩增支原体DNA，从而检测支原体的存在。PCR法具有高灵敏度和特异性，已成为日常细胞培养维护的可靠方法。

4. 核酸扩增技术（NAT）：NAT技术通过扩增并检测特定的支原体基因组保守序列来进行支原体污染检测，具有快速、简便的特点。

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