qPCR法,即定量聚合酶链式反应(QuantitativePolymeraseChainReaction)法,在支原体检测中的应用主要体现在以下几个方面:
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方法 |
灵敏度 |
优势 |
劣势 |
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培养法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准 |
ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基 |
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DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性 |
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间接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测 |
ü 费时 ü 需要细胞系指示 |
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ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客观,易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属 |
ü 受抗体限制 ü 价格高 |
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免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高 |
ü 可检测的支原体种属有限 |
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放射自显影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力 |
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生物发光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 |
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PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 细胞培养中支原体污染的后果? |
一步法快速支原体检测的原理?广州细胞支原体预防试剂
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