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杭州细胞支原体去除试剂多少钱

细胞培养中建议使用支原体检测的原因主要有以下几点： 1. 支原体污染率高：常规细胞培养中支原体污染率保守估计在...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

细胞培养中建议使用支原体检测的原因主要有以下几点：

1. 支原体污染率高：常规细胞培养中支原体污染率保守估计在15-35%之间。

2. 影响实验结果：支原体污染会严重干扰实验结果的可信度，影响培养细胞的形态和生理特征。

3. 难以用光学显微镜检测：支原体是极小的细菌，其细胞膜周围没有细胞壁，无法用光学显微镜检测到。

4. 难以消灭：支原体能够迅速渗透整个实验室，一旦污染很难彻底消灭。

5. 影响产品质量：支原体污染会影响细胞培养产物的质量，监管机构推荐检测所有细胞培养产物中是否存在支原体。

6. 保证实验准确性：定期进行支原体检测和去除，确保无支原体存在细胞培养体系内，才能获得准确的实验结果。

什么样的客户需要定期检测支原体污染？杭州细胞支原体去除试剂多少钱

在科研中，支原体检测是确保细胞培养纯净性的重要环节。以下是一些在科研中常见的支原体检测方法：

1. 支原体培养法：这是一种传统的检测方法，通过将细胞培养物接种到特定的培养基中，观察是否有支原体生长。这是直接的检测方法，但耗时较长，通常需要数周时间。

2. DNA染色法：使用荧光染料（如Hoechst或DAPI）染色细胞核，然后通过荧光显微镜观察。这种方法操作简便，可以快速得到结果，但特异性不高，可能会有假阳性。

3. 聚合酶链反应（PCR）法：这是一种分子生物学技术，通过设计特异性的引物，扩增支原体DNA，从而检测支原体的存在。PCR法具有高灵敏度和特异性，已成为日常细胞培养维护的可靠方法。

4. 核酸扩增技术（NAT）：NAT技术通过扩增并检测特定的支原体基因组保守序列来进行支原体污染检测，具有快速、简便的特点。

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LAMP法，即环介导等温扩增法（Loop-mediated isothermal amplification），在支原体检测中的应用具有以下特点和应用场景：

1. 日常监测：由于LAMP法的快速和简便性，它适用于生物实验室的日常监测，可以及时检测出支原体的存在，确保实验结果的准确性和可靠性。

2. 疾病诊断：LAMP法已被成功应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，并在2009年甲型H1N1流感事件中发挥了重要作用。

3. 临床应用：LAMP法在临床样本的检测中显示出了快速、高灵敏度和稳定性，可以用于检测实验室样本及临床样本中的支原体。

4. 多病原体检测：LAMP法可以同时检测多种病原体，包括肺炎支原体在内的多种下呼吸道感*的病原体，为临床诊疗提供询证依据。

5. 与其他技术结合：LAMP法可以与CRISPR-Cas12a等其他技术结合，建立新的检测方法，提高检测的效率和准确性。

方法	灵敏度	优势	劣势
培养法	☆☆☆	ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准	ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基
DNA染色 (DAPI or Hoescht)	☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性
间接染色	☆☆☆	ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测	ü 费时 ü 需要细胞系指示
ELISA	☆☆	ü 迅速 ü 客观，易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属	ü 受抗体限制 ü 价格高
免疫染色	☆☆	ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高	ü 可检测的支原体种属有限
放射自显影	☆☆	ü 迅速	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力
生物发光	☆☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属
PCR	☆☆☆	ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
Real-Time PCR	☆☆☆	ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
LAMP	☆☆	ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性为什么要去除支原体？

细胞培养中支原体难以彻底消灭的原因主要包括以下几点：

1. 无细胞壁结构：支原体是没有细胞壁的微生物，这使得许多作用于细胞壁的抗*素对支原体无效。

2. 微小体积：支原体体积小，能够穿过常规的除菌滤膜，例如0.20微米甚至0.10微米的滤膜。

3. 隐匿性：支原体污染初期很难被察觉，它们在普通光学显微镜下几乎不可见，因此细胞被支原体污染后，前期很难被发现。

4. 传播途径多样：支原体可以通过细胞培养物、细胞悬液、细胞培养用具等途径迅速传播。

5. 污染源：支原体污染源包括细胞间的交叉污染、操作人员的口腔、皮肤，以及细胞培养用的组分如血清、培养液等。

6. 环境因素：实验室环境、试验台、超净台、培养箱等可能被支原体污染，引起细胞的污染。

7. 抗*素耐药性：支原体可能对某些抗*素产生耐药性，使得治*效果变差。

8. 检测和清理方法的局限性：一些传统的支原体检测和清理方法可能不够灵敏或有效，导致难以彻底清理支原体

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支原体检测中的PCR法和LAMP方法各有其优势和劣势，以下是两种方法的比较：

PCR法

优势:

1.高灵敏度：PCR法可以扩增支原体DNA，具有很高的灵敏度。

2.操作简便：PCR操作相对简单，结果准确，速度快，通常3个小时左右即可得到结果。

3.可靠性：PCR法已成为日常细胞培养维护的可靠方法，是细胞样本库保护细胞的方法。

劣势:

1. 样品量需求：相对于某些快速检测方法，PCR可能需要较多的样品量。

2. 检测周期：尽管PCR法相对快速，但在某些情况下，检测周期可能较长。

LAMP法

优势:

1. 设备简单：只需要一个稳定的恒温环境，如恒温水浴或热拟温器，不需要复杂的温度控制设备。

2. 高特异性：LAMP技术采用多个特异性引物，提供了较高的特异性。

3. 结果可视化：LAMP扩增产物可形成肉眼观察的颜色产物，有助于直接观察扩增结果。

劣势:

1. 引物设计复杂：需要设计多个引物，包括外部引物、内部引物和环引物，引物设计较为复杂。

2. 避免污染：由于没有封闭系统，避免污染造成的假阳性是一个问题。

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