PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。宠物传染病检测技术方面,核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性,可很大程度缩短传染病检测的窗口期。江苏PCR仪器生产公司
在宠物医院,往往没有专业的实验环境与PCR分区,样本中病原体污染、PCR反应后产物污染都是会很影响PCR结果,导致假阳性的出现,其中PCR产物污染是导致化验室环境污染**主要的因素(PCR反应中DNA的复制是指数级的增长)。而选择不善于处理低浓度样本与复杂样本的提取方法,导致核酸提取不完全或者在**1后PCR反应中存在抑制物,污染PCR反应,则会导致漏检,产生假阴性。这些都是在核酸检测过程中需要注意的点。巧亦捷PCR反应系统采用磁珠法核酸提取纯化加荧光探针PCR方法,整机一体化,实现一机提取加扩增,减少人工操作与培训时间,轻松上手。避免污染。结核PCR检查PCR检测正越来越多的被动物临床医师所接受,并广泛应用于动物临床疾病诊断。
市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端:1.由于PCR灵敏度极高,实际应用中污染较严重,一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变,从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板,必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物,局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术,检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增,无需高标准的检测环境,可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。
巧亦捷全自动核酸一体机对于动物诊疗至关重要,于临床而言更是不可或缺。对于刚接回家的小宠物或注射疫苗前的小宠物,做PCR病毒学检查至关重要,可有效地排查致命传染病,可降低刺激导致潜伏病毒的激发,大幅提高相关传染病的康复几率。核酸检查对于潜伏病毒筛查能力比胶体金试纸,提早检测到病毒至少1周左右。也可以检测到疾病康复后两周以上的病毒。也可以惊醒早期干预诊疗,让一些严重的病,康复几率极大的提高。宠物医院拥有自己的PCR的检测速度比送到专业实验室提升了好几十倍。可帮助兽医师更有效的应对发病快速、病情严重的传染病诊疗。巧亦捷利用了先进的薄膜微流控技术和qPCR核酸检测技术。
巧亦捷核酸检测一体机能“稳、准、快”的检测出禽病。以犬瘟为例,CDV经由鼻、咽和上呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁挑体中增殖,动物表现为ZUI初的体温升高和白细胞减少(主要是淋巴细胞减少)。传染第、一周会出现病毒血症,通过血液循环,CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮结构的固有膜,身体的所有分泌物中开始向外排毒。因此在病毒传染初期是无法在眼鼻分泌物中采集到病毒的,即便有少量病毒存在,胶体金试纸板也很难检测出正确的结果。这是由于胶体金试纸板上包被的抗体需要和特异抗原结合后再和预先包被的二抗结合才能显示结果,这其中需要的抗原(病毒)量较多。而PCR检测是将抗原进行扩增,只要存在抗原就可以通过特异性引物进行扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳,可见到预期大小的DNA条带出现,从而对病原体的基因组片段作出鉴定。因此,我们更推荐兽医师们使用巧亦捷核酸检测一体机。传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。巧亦捷PCR检测技术
巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势,像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。江苏PCR仪器生产公司
无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。即使存在于患犬或患猫体内极少量的病原微生物,巧亦捷核酸一体机采用的PCR技术也能对病原微生物进行上百万倍的复制,从而达到可以被检出的浓度,因此巧亦捷核酸一体机能对犬猫传染病进行准确、高效的诊。例如猫鼻气管炎是由猫疱疹病毒引起的一类猫上呼吸道疾病,当猫传染疱疹病毒后,会表现出一系列的上呼吸道症状,但临床尚未有成熟的快速检测方法,用巧亦捷核酸一体机则可以快速准确的得出结果。江苏PCR仪器生产公司