采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。将动物放在一个旋转的木棒上,观察动物是否能保持平衡,以评估动物的平衡能力和协调性。动物实验脑梗MCAO模型水迷宫
脑梗MCAO模型成功后,水迷宫在Morris水迷宫获得性训练、探查训练和对位训练中,各组间大鼠游泳潜伏期、游泳距离和游泳速度指标均无显*差异。对位探查训练中,与假手术组相比,模型组大鼠平台所在象限时间百分比、平台所在象限时间和进入平台所在象限次数均显*减小(P<0.05,P<0.01); 旷场试验旷场实验结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠穿越格子数显*增加(P<0.05);与模型组相比,阳性*组大鼠穿越格子数显*减少(P<0.01)。各组大鼠后肢站立次数和中*格停留时间均无显*差异。动物实验脑梗MCAO模型水迷宫当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。
缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。由于小鼠的脑血管解剖特点与人类较为相似,故小鼠广泛应用于缺血性脑梗死的研究当中。缺血性脑梗死除了会影响缺血的区域之外,还会影响相关的神经甚至整个中*神经系统。因此小鼠缺血性脑梗模型有助于研究神经连接和大脑整体的改变。这有助于推动缺血性脑卒中等脑科学的进步。 进一步研究小鼠缺血性脑梗死模型,科学家们可以深入了解脑梗死的发病机制、病理生理过程以及神经功能损害。通过不断优化实验方法和技术,研究人员可以更精确地模拟人类缺血性脑梗死的临床表现,为临床治*提供有力的实验依据。
通过神经功能缺损评分,研究人员可以定量地评估脑梗死后对动物神经功能的影响。这对于研究脑梗死的病理过程、治*方法以及药物效果具有重要的意义。同时,这种评分方法也可以为临床医生提供参考,帮助他们更好地评估患者的神经功能缺损程度。 需要注意的是,神经功能缺损评分只是一种评估方法,不能完全戴*动物的神经功能状态。因此,在实验中还需要结合其他指标和方法进行综合评估。此外,由于实验动物的个体差异和环境因素的影响,实验结果也可能存在一定的误差。因此,在进行实验研究时需要严格控制实验条件和操作过程,以保证实验结果的准确性和可靠性。在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。将尼龙线由大(小)鼠的颈外动脉插入,经颈内动脉阻断一侧MCA起始端,导致一侧(局灶性)脑缺血。
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。血管分离,在分离右侧CCA、ECA、ICA时,要注意迷走神经的保护, 减少对迷走神经的损伤。动物实验脑梗MCAO模型水迷宫
通过外包实验,可以降低实验室的运营成本,包括设备维护、人员培训等费用。动物实验脑梗MCAO模型水迷宫
小鼠缺血性脑梗死模型在药物开发方面具有重要应用。通过模拟脑梗死的发病过程,可以评估各种潜在药物的治*效果,筛选出具有疗效的药物进行临床试验。同时,模型还可以用于研究药物的副作用和毒性,为药物的安全性和有效性提供评估依据。神经康复,小鼠缺血性脑梗死模型在神经康复方面也有重要应用。通过观察模型中神经细胞的再生和修复过程,可以了解神经康复的机制,为制定有效的康复方案提供理论支持。同时,模型还可以用于评估各种康复手段的效果,为临床实践提供指导。动物实验脑梗MCAO模型水迷宫