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免疫组化基本参数
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免疫组化企业商机

细胞属性的判定,免疫组化也可以进行这方面的临床应用。通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分,来判定细胞的属性,确定cancer的来源。如细胞角蛋白(CK)是上皮性标记,CK阳性提示cancer为上皮源性cancer;降钙素抗体是甲状腺髓样cancer特有的标记;甲状腺球蛋白(Tg)阳性提示是甲状腺滤泡性cancer;前列腺特异性抗原(PSA)只见于前列腺上皮;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性则提示胶质cancer;CD20和CD79a阳性则提示B细胞淋巴瘤;平滑肌肌动蛋白(Actin)阳性提示cancer为平滑肌源性;胃肠道间质瘤中原cancer基因蛋白产物CD117阳性;血管源性cancer中内皮细胞标记物CD34阳性等等。如果您需要做实验外包,可以与我们英瀚斯生物进行联系。英瀚斯生物,专业病理染色切片平台,免疫组化效果好!江西病理免疫组化多少钱

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实验失败常见问题分析有哪些:

为什么在显微镜下观察发现所有的切片都成阴性?

答:这种现象主要是由操作不当导致,可能的原因有:1.染色操作不当,致使染色失败;2.漏加一种抗体或者制备出的抗体没有活性;3.缓冲液中有叠氮化钠,抑制了酶的活性;4.复染或脱水剂使用不当等。建议逐一排查,找到原因后重新进行实验。

在显微镜下观察发现所有的切片都成阳性,这是为什么?答:与上一个问题类似,出现的原因也是试验操作存在问题,可能的原因有:1.切片在染色过程中抗体过浓,或者干片了;使用的呈色底物溶液已变色或呈色反应时间过长;3.抗体温育的时间过长等。

在显微镜下观察发现切片的背景很深,这是为什么?答:以下几方面会导致切片的背景过深:1.蛋白质封闭不够或所用血清溶血,造成抗体的非特异性反应;2.内源性过氧化酶没有完全阻断,显色过程中过氧化酶与酶底物反应,造成背景;3.底物呈色反应时间过长或呈色反应后漂洗不彻底。 新疆什么是免疫组化多少钱关于免疫组化,你想知道的都在这里!

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免疫组化结果中的假阴性是指所有抗体标记的切片均呈阴性,无阳性信号,假阴性结果不是真实的反应。导致假阴性结果的原因有:(1)抗原修复方法选择不当,根据不同的抗原特点采用不同的修复方法,大多数抗体要求热修复,热修复又包括高压修复、微波修复及煮沸热修复;而对某些细胞内抗原和细胞间质抗原需要用酶消化,如表皮生长因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,而Vimentin则不用修复;(2)一抗本身的问题:一抗效价降低或失效。在免疫组化中染色结果的假阴性会导致错诊或漏诊,进而影响临床诊断及延误医疗。解决这一问题的可通过设立阳性对照,比较两者染色结果。若阳性对照有表达,表明试剂和染色体系及实验步骤均无问题;若阳性对照无表达,则检测过程中某一试剂或某个步骤存在问题,应逐一查找原因。

免疫组化实验注意事项总结:

Ø本实验室所用切片一般是石蜡切片。

Ø烘片:使蜡片水分蒸发,石蜡软化,组织切片牢固贴在玻片上;烘片至跟烘片前透明度有差异。

Ø抗原修复时,使片子始终浸没在修复液中,液体不能干。

Ø一抗孵育在37度培养箱,湿盒放置1h,省时间和结合效果好,不要超过1h,容易过染。

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Ø二抗使用:两个二抗放大信号或一个二抗;若抗体信号强,可不用放大信号,尽量增大信噪比。

Ø10XDAB在常温溶解,尽可能现用现配,放于4度储存时间久了效果不佳。

Ø复水和脱水时所用的梯度酒精不可混用,要区分开。

Ø加抗体和显色液时,都要将片子甩干,在半干半湿的状态下再加,不然容易造成溶液的二次稀释。

Ø整个操作过程中在显色之前,一定不能干片。 免疫组化流程是什么样的?

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免疫组化的结果分析:

免疫组化实验通常需要设置阳性对照、阴性对照(或替代对照)(阳性对照是排除方法和实验系统有无问题;阴性对照与替代对照是排除有无非特异性染色)。一般情况下,阳性对照颜色的特点为:Ag定位,包浆、胞核、胞膜、间质具有结构性。且染色的强度不同(颜色深浅不一);阴性对照的特点为:染色细胞与组织无区别,颜色具有弥散性,分布均匀。

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说明:免疫组化实验可以对结果进行定量分析,但要实验得到的必须是高质量的染色切片,要求背景染色浅且特异性染色较深,这样分析的结果才会比较准确。 英瀚斯生物,组织包埋、切片、染色、免疫组化拍照、报告分析,一站式搞定!陕西大鼠免疫组化怎么选择

免疫组化常见问题原因分析!江西病理免疫组化多少钱

在临床应用中,免疫组化还可以进一步分类不同qi官与组织交界处cancer。由于重叠的特征,在一些组织qi官交界处的cancer,只凭组织学基础对cancer进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST),还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的cancer有睾丸胚胎cancer与精原细胞cancer,两者较难区别,且医疗与预后明显的不同,但用免疫组化检测角蛋白就较易于区别:角蛋白阴性则为精原细胞cancer,而角蛋白阳性则为胚胎cancer。江西病理免疫组化多少钱

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