递送核酸的脂质体中的脂质成分脂质体的脂质组成可以影响阳离子脂质的结构性质及其转染效率。由3β[N(N',N'Dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,(DC-Chol)和DOPE组成的阳离子脂质体被认为是高效基因传递的代表性脂质体。对于质粒DNA传递，DC-Chol与DOPE的***摩尔比被发现为1:2。质粒DNA的转染效率随着DC-Chol与质粒DNA质量比的增大而降低，比较高转染效率为3:1。**近的一项研究报道了不同的内吞途径对阳离子脂质体组成的可能依赖性。由质粒DNA加DC-Chol或DOPE为基础的阳离子脂质组成的脂质体优先通过内吞作用进入细胞，而包括1,2-二酰-3-三甲基丙烷胺(DOTAP)或DistearoylPhosphatidylcholine(DSPC)为基础的阳离子脂质体的脂质体则被非特异性的液相巨胞饮作用所吸收。阳离子脂质体递送化药和核酸的优势。海南济南脂质体载药
2脂质体的主要成分
⽢油磷脂(GP)、鞘磷脂(SM)和胆固醇(Chol)是市场上脂质体产品中使⽤的基本成分。GP含有⽢油，它连接⼀对疏⽔脂肪酸链和⼀个亲⽔极性头基。脂肪酸和极性头基团的类型。在⽣理pH下，不同的头部组提供负(PA、PS、PG和⼼磷脂)或中性(PC和PE)电荷的脂质体。带负电的DSPG⽤于AmBisome(注射⽤两性体脂质体)，可与带正电的AmpB胺基相互作⽤，形成稳定的离⼦配合物，⽽⽤于Vyxeos的DSPG通过强⼤的库仑斥⼒使脂质体聚集**⼩。⽤于DaunoXome(柠檬酸柔红霉素脂质体注射液)、Onivyde(伊⽴替康脂质体注射液)和Vyxeos的DSPC是⼀种中性合成脂质，具有明确的脂肪酸组成(两分⼦硬脂酸)、⾼纯度和相对⾼的相转变(Tm为55◦C)。EPC作为赋形剂加⼊Myocet和Visudyne(维替泊芬粉为输液溶液)中。EPC是从蛋⻩中纯化的天然磷脂(NPL)。与半合成脂和合成脂相⽐，NPL的⽣产成本较低，但转变温度较宽，难以获得完全相同的NPL，并且脂质体可能存在批次差异。此外，EPC的不饱和脂肪酸导致了−15～−5◦C的低相变温度，表明脂质体双分⼦层在体温中处于⽆序和药物“漏出”状态。 绿色荧光脂质体载药蛋白相变温度对脂质体的影响。
脂质体制备方法：破碎技术尺⼨和尺⼨分布是脂质体性能和安全性的关键属性。有⼏种⽅法可⽤于减少脂质体的尺⼨，如(超)超声(通过浴或探针)，挤压，均质，或组合⽅法，如冻融挤压，冻融超声和⾼压均质挤压技术。在这些技术中，挤压和⾼压均质(HPH)是在制药制造中**常⽤的技术。⼤尺⼨的脂质体通过聚碳酸酯膜(50nm～5µm)成为粒径分布精细的较⼩的脂质体。众所周知，商业化的纳⽶脂质体产品，包括Onivyde、Vyxeos、Marqibo等，都是采⽤这种⽅法进⾏⽣产的。该⽅法相对简单，重现性好，只需要适中的条件。尺⼨减⼩的潜在机制是MLV在膜孔⼊⼝处破裂，并在膜通过过程中重新排列。关键的⼯艺参数，如聚碳酸酯膜的孔径、通过循环次数、压⼒和流速等，都可以影响脂质体的⼤⼩和⽚层性。Ong等⼈发现，在⽐较其他不同的纳⽶化技术(包括冻融超声、超声和均质化)时，挤出是***的技术。然⽽，挤压可能会降低脂质体的包封性并改变不对称脂质体的结构。HPH⽤于⽣产各种纳⽶制剂，如脂质体、纳⽶晶体和纳⽶乳液。它既适⽤于⽔体系，也适⽤于⾮⽔体系，并提供不同的⽣产规模，从容量为10L/h的实验室规模到容量为10万L/h的⼤型⽣产规模。
利用设计的脂质，他们发现由1,2-二油醇-3-二甲基氨基-丙烷（DODMA）阳离子脂质组成的核酸脂质颗粒在小鼠和食蟹猴中分别以0.01mg/kg和0.3mg/kg的剂量包封siRNA时表现出基因沉默作用。**近的一项构效关系研究表明，脂质结构的细微差异可能导致转染效率的明显差异。作者设计并合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷环基和含咪唑的阳离子脂质，它们具有不同的疏水区域(例如，分别为胆固醇和双薯蓣皂苷配基)。结果表明，这两种阳离子脂质在HEK293细胞中诱导有效的基因转染。脂质体制备方法：溶剂注射技术。
microRNA脂质体
microRNA是真核细胞中发现的短(约22mer)非编码RNA，通过结合互补的mRNA序列发挥生物调节剂的作用。miRNA以初级miRNA的形式从其编码的核基因转录，其长度为数百个核苷酸。RNaseIII酶，Drosha，将初级miRNA加工成pre-miRNA(长度为70个核苷酸)，携带一个特征的发夹环。然后pre-miRNA移动到细胞质中，在那里RNaseIII酶Dicer产生成熟的miRNA和乘客链。***，成熟的miRNA被整合到RNAi诱导的沉默复合体中，以降解它们的靶mRNA。由DOTMA、胆固醇和vitaminETPGS1k琥珀酸盐组成的阳离子脂质体被证明可以有效递送pre-miRNA-133b,导致A549非小肺*细胞中成熟miRNA-133b的表达比对照组细胞增加2.3倍，Mcl-1蛋白的表达减少1.8倍。经尾静脉注射含有pre-miRNA-133b的阳离子脂质体(1.5mg/kg)的ICR小鼠肺组织中成熟miRNA-133b的表达比接受含有紊乱的pre-mirna的阳离子脂质体的小鼠高52倍。 固体脂质纳米颗粒和纳米结构脂质载体的区别。全氟烷脂质体载药设计
递送核酸的脂质体中的脂质成分有阳离子脂质、助脂、胆固醇结合DSPE-PGE2000等。海南济南脂质体载药
阴离子脂体由带负电荷的脂质组成，如磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸和磷脂酸，由于它们被巨噬细胞摄取，循环时间缩短。带负电的小脂质体比其对应的中性和带正电的脂质体被***得更快。此外，在带负电荷的小脂质体中观察到一种双相***模式。 另一方面， 与中性和带正电的脂质体相比， 血液单核细胞和肺在带负电的大脂质体的摄取中起主要作用。表面修饰的脂质体(携带配体)比天然脂质体更容易被***。 然而， 脂质体通过掺入胆固醇可在一定程度上减少肝脏对脂质体的摄取， 这可能会使磷脂包装转变为更坚硬有序的膜。海南济南脂质体载药
