真核有参转录组测序（RNA-seq）是一种在有参考基因组的物种中进行的高通量转录组测序技术，通过二代测序平台，可以快速地获得动植物特定细胞或组织的转录本及基因表达信息。这种技术在生物学研究中扮演着重要的角色，可以用于研究基因表达水平、基因功能、可变剪切、SNP以及新转录本的发现等方面。RNA-seq技术是一种利用高通量测序技术对RNA样本进行测序的方法，可以获得特定组织或细胞中的所有转录本的信息，包括mRNA、小RNA、rRNA和lncRNA等。真核无参转录组测序技术帮助揭示生物体内基因调控网络的复杂性和多样性。edman 法测序
RNA-seq技术的主要步骤包括：RNA提取：首先从待测样品中提取总RNA，通常采用TRIzol法或商用RNA提取试剂盒进行RNA提取，保证RNA的纯度和完整性。cDNA合成：通过逆转录（reverse transcription）反转录RNA为cDNA，接着合成双链cDNA。文库构建：对双链cDNA片段进行末端修复、连接连接器（adapter）序列，形成文库。测序：将文库片段建桥、扩增后通过二代测序平台进行高通量测序。数据分析：对测序得到的数据进行基因定量、差异表达基因分析、可变剪切和新转录本的分析等。说出真核与原核基因转录的异同将真核无参转录组测序技术与其他组学技术（如蛋白质组学、代谢组学）相结合，实现多维度数据整合分析。
在生命科学的浩瀚领域中，对基因表达和调控的深入探究一直是科学家们不懈追求的目标。真核有参转录组测序（RNA-seq）的出现，犹如一把神奇的钥匙，为我们打开了一扇通往基因奥秘世界的大门。对于那些具有参考基因组的物种而言，真核有参转录组测序成为了一种极其强大的工具。通过二代测序平台，它能够以惊人的速度和全面性，获取动植物特定细胞或组织的转录本以及丰富的基因表达信息。基因表达水平的研究是RNA-seq的重要应用之一。它使我们能够清晰地了解在特定条件下，哪些基因被，哪些处于沉默状态，以及它们表达量的高低变化。这对于理解生物的发育过程、应对环境刺激的反应机制以及疾病的发展都具有至关重要的意义。例如，在植物研究中，通过RNA-seq可以揭示不同生长阶段或不同环境胁迫下基因表达的动态变化，为培育优良品种提供关键线索。
在过去的科学研究中，RNA测序技术一直是生命科学领域中的重要工具，可以帮助研究人员深入了解基因表达的调控机制和细胞功能。而在RNA测序技术中，短读测序平台一直被广泛应用，特别是Illumina的短读测序平台，由于其高通量和准确性而备受青睐。短读测序平台通常适用于对大量样本进行快速测序，但对于一些复杂的基因结构研究和转录本重构等方面存在一定的局限性。然而，随着长读长RNA测序技术的不断进步和发展，研究人员现在有了更强大、更准确的工具来解决一些之前无法解决的问题。长读长RNA测序技术能够产生更长的序列，帮助研究人员更精确地确定基因的结构和转录本的组装。通过对转录出的 RNA 进行建库测序，我们能够获取大量关于基因表达水平以及基因功能等方面的宝贵信息。
Illumina优势与局限优势：高通量：Illumina平台可以在单次测序中产生数十亿个读长短的测序数据，提高了测序效率。高精度：Illumina采用的测序化学和光学检测技术，可以实现较高的碱基测序准确率，通常碱基错误率低于1%。成本低廉：随着技术的进步，Illumina测序的成本已大幅下降，使得大规模测序项目更加经济可行。广泛应用：Illumina平台广泛应用于基因组测序、转录组测序、表观遗传学等多个领域。局限：读长较短：Illumina测序的读长一般在50-300bp之间，相对较短，在比如可变剪接中可能存在局限性。研究者需要从目标组织或细胞中提取总RNA，并通过反转录将RNA转录成cDNA。转录组测序分析费用
链特异性转录组能够更准确地统计转录本的数量。edman 法测序
长读长RNA测序的出现无疑拓展了RNA测序技术的研究范围和深度。随着长读长RNA测序技术的不断完善和应用，我们相信将会有更多令人振奋的发现和突破出现，推动生命科学领域的前沿研究不断向前发展。让我们携手共进，充分利用这些先进的技术手段，不断深入探索基因的奥秘，为人类的健康和科学的进步贡献自己的力量。在这个充满无限可能的基因研究领域，Illumina 短读长测序平台和长读长 RNA-seq 将继续我们走向未知，开启一个又一个新的科学篇章。edman 法测序
