HE染色标本一般是针对石蜡标本,脂滴和石蜡都是的有机物, 都具有非极,脂滴应该可以溶解石蜡的。 HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法。 H:Hematoxylin,苏木精 E:Eosin,伊红 苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱染料染色的结构具有嗜碱。 伊红(,E)是一种酸染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸染料染色的结构具有嗜酸。染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,***入蒸馏水,就可染色。南京英瀚斯生物常用HE染色试剂配制方法。上海HE染色检测
HE染色常见问题:切片染色不均匀,有片状的弱着**存在答:(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般比较好角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。内蒙古推荐的HE染色公司HE染色,一站式实验外包服务平台。
HE染色切片中出现类似色素样的点状结晶和黑色光滑的细胞核原因:切片封片前放置在空气中时间太长,以至于二甲苯挥发切片干燥所致。对策:移去组织切片上的盖玻片和封固剂,重新处理。将切片水洗数分钟,然后重新脱水、透明、封固。封片过程中要保持组织切片的轻度湿润,尽量不要让其干燥。细胞核呈红、棕色改变原因:苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。对策:首先,每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力,发现氧化过度应及时更换。其次,可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氢钠等,在苏木精染色后,给切片以足够的蓝化时间。
HE染色显微镜下见切片内有大量水珠分析以及应对原因:切片经梯度乙醇处理后没有完全脱水,导致二甲苯透明中性树胶封固后残留大量水分。对策:移去盖玻片,用二甲苯溶解封固剂如中性树胶。将切片置入新鲜的无水乙醇中,待切片重新脱水完全后,用新二甲苯透明,中性树胶封固。所有用于脱水和透明的液体,在使用一定时间以后,应即时更换。光镜下切片某些区域难以聚焦分析以及应对原因:盖玻片上可能有封固切片的封固剂。对策:移去盖玻片,重新用干净的盖玻片封片肝脏组织HE染色如何观察。
HE染色细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。HE染色中固定液如何配置。内蒙古推荐的HE染色公司
冰冻组织切片的HE染色。上海HE染色检测
HE染色常见问题:Q3:细胞核染色过浅,颜色暗淡答:切片在苏木素染液中停留过短,或苏木素过度氧化失效,或分化时间太长。对策:重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液,每个3-5min即可,接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h,自来水冲洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h,自来水冲洗10min染色。Q4:细胞核染色过深,胞浆着蓝色答:切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。上海HE染色检测