实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价。本地脑梗MCAO模型企业
将小鼠进行呼吸诱导麻醉(异氟烷)后,以仰卧位固定于操作台上,继续维持麻醉,常规消毒,备皮,取颈部正中切口,分离右侧颈部总动脉(CCA)、劲内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),结扎ECA远心端,在ECA起始端留置结扎线,用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断,将ECA拉至与ICA成一条直线,于结扎线近端用显微剪剪一斜口,将MACO栓线缓缓送入,栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后,单道结扎ECA近心端结扎线,使栓线与血管相对固定,随即松开ICA上的动脉夹,缓慢上提ECA近心端结扎线,将栓线缓慢送入,进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓线插入40 min后拔出,随后将ECA近心端结扎线结扎,松开CCA近心端动脉夹,碘伏消毒后逐层缝合切口。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型周期外包公司通常拥有高效的实验流程和专业的实验人员,能够确保实验的快速完成,节省实验时间。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。通过外包实验,可以降低实验室的运营成本,包括设备维护、人员培训等费用。
此外,小鼠缺血性脑梗死模型还可以为神经科学研究提供更多启示。例如,研究者可以通过研究小鼠缺血性脑梗死后神经网络的改变,探讨神经连接与大脑功能的关系,进一步揭示大脑的工作机制。这对于理解神经精神疾病的发病机制、开发新型治*手段具有重要价值。 总之,小鼠缺血性脑梗死模型在研究脑梗死发病机制、药物开发、神经康复以及神经科学进展方面具有重要意义。通过深入研究小鼠缺血性脑梗死模型,我们可以期待为人类缺血性脑梗死的防治带来更多突破性进展,提高患者的生活质量和生存率。同时,这一模型也有助于推动我国脑科学研究的快速发展,为神经精神疾病的防治贡献力量。当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。本地脑梗MCAO模型企业
将尼龙线由大(小)鼠的颈外动脉插入,经颈内动脉阻断一侧MCA起始端,导致一侧(局灶性)脑缺血。本地脑梗MCAO模型企业
1、大脑中动脉阻塞(MCAO)模型-啮齿类 诱导方式:线栓法堵塞大脑中动脉动物种属:大鼠模型特征:模型可高度再现的MCA梗死、具有明确的缺血半暗带(有梗死风险但潜在可恢复的低灌注组织)、可再现的感觉运动和认知缺陷、可用于评估神经保护药物、不适合溶栓药物研究、动物会有死亡,尤其是缺血时间越长时、分缺血再灌注模型和永jiu缺血模型 缺血再灌注模型与永jiu梗死模型差别:缺血再灌注模型包括原发性脑组织损伤和缺氧再灌注后由能量代谢紊乱引起的继发性损伤,两种损伤之间存在时间差;永jiu梗死模型无此特征、永jiu梗死模型梗死核*区相比缺血再灌注模型更大,缺血半暗带可能更小、永jiu梗死模型动物死亡率相对更高本地脑梗MCAO模型企业