5.荧光标记的定量分析：通过测量荧光信号的强度，可以对载药脂质体中药物的含量进行定量分析。这对于确定药物的释放量、药物在体内的浓度以及载药脂质体的稳定性等方面至关重要。荧光标记可以提供一个快速、准确的定量检测方法，为药物输送系统的研究和应用提供了便利。6.探索药物的药代动力学：荧光标记的载药脂质体可以用于研究药物的药代动力学，包括药物的吸收、分布、代谢和排泄过程。通过监测荧光信号的变化，可以跟踪药物在体内的动态变化，从而更好地理解药物的药效学特性。7.提高***效果：荧光标记的载药脂质体还可以用于提高***效果。通过荧光标记，可以实现对***部位的精确定位和定量释放，从而提高药物的局部浓度和***效果，减少对健康组织的损伤和副作用。8.研究药物的靶向性：荧光标记的载药脂质体可以用于研究药物的靶向性。通过将靶向配体或抗体与荧光标记的载药脂质体结合，可以实现对靶向部位的定位和跟踪，从而更好地了解药物的靶向性和作用机制。脂质体制备方法：原位制备脂质体。吉林北京脂质体载药
1脂质体结构
脂质体根据室室结构和层状结构可分为单层囊泡(ULVs)、寡层囊泡(OLVs)、多层囊泡(MLV)和多泡脂质体(MVLs)。OLVs和MLV呈阴离⼦样结构，但分别存在2-5和>5个同⼼脂质双分⼦层。与MLV不同，MVLs包括数百个由单层脂质膜包围的⾮同⼼⽔室，并呈现蜂窝状结构。根据颗粒⼤⼩，ULVs可进⼀步分为⼩单层囊泡(SUVs，30-100nm)、⼤单层囊泡(LUVs，>100nm)和⼤单层囊泡(LUVs，>1000nm)。Arikaye(阿⽶卡星脂质体吸⼊悬浮液)因其⼤粒径(200-300nm)⽽被认为是LUV。Vyxeos(注射⽤柔红霉素:阿糖胞苷脂质体)是⼀种双层脂质体系统(，它是在第⼀次药物阿糖胞苷装载过程中产⽣的。内部⽚层形成的机制被解释为脂质双层的热⼒学响应，以减少脂质体的表⾯积体积⽐，这是由于⽔的流出⽽引起的，以应对外部渗透挑战。Myocet(阿霉素脂质体)和Mepact(⽶法莫肽脂质体粉剂⽤于浓缩分散输注)为MLV。丰富的⽚层为亲脂化合物的包封提供了较⼤的空间。直径为微⽶的产品有Mepact、DepoCyt(阿糖胞苷脂质体混悬液)、DepoDur(硫酸**缓释脂质体注射液)和expel(布⽐卡因脂质体注射混悬液)四种。Mepactis为⽆菌冻⼲饼，⽤0.9%的⽣理盐⽔溶液重构后，会形成粒径为2.0-3.5µm的多层脂质体。 济南脂质体载药空化作用脂质体各组分对核酸递送效率的影响。
为了***免疫性疾病，将针对甘油醛3-磷酸脱氢酶(***DH)的siRNA与含1,2-dilinoleyl-4-(2-dimethylaminoethyl)-[1,3]-dioxolane、DSPC和胆固醇的阳离子脂质体络合。用该复合物(5mg/kgsiRNA)处理小鼠，4天后，腹腔巨噬细胞和树突状细胞的***DH表达量减少40%，脾源性抗原呈递细胞的***DH表达量减少60%。在其他研究中，将重链铁蛋白特异性siRNA与阳离子脂质体结合，并局部给药于荷U251细胞的人胶质瘤小鼠。**内注射铁蛋白特异性siRNA与DC-Chol和DOPE组成的阳离子脂质体复合物，其抑制**生长的程度与卡莫司定(一种主要用于胶质瘤***的DNA烷基化剂)相当。argonaute-2特异性siRNA已被证明可诱导细胞凋亡，使用由DC-6-14、DSPC、DOPE和DSPC-PEG2000组成阳离子脂质体递送argonaute-2特异性siRNA时发现，将这些复合物静脉注射到接种Lewis肺*的小鼠体内(每隔一天1mg/kg，共5次)，这些复合物可降低**组织中argonaute-2的表达，并***抑制**生长。
商业脂质体产品，包括Visudyne和AmBisome，使⽤这种⽅法制造。MLV悬浮液在⾼压下通过⼀个狭窄的间隙，通过剪切⼒、湍流和速度梯度产⽣的流体空化⽽被分解，然后重新排列成更⼩的脂质体。颗粒⼤⼩和粒度分布由均质过程的参数决定，如压⼒、处理周期、阀⻔和冲击设计、流速等;它们还受到样品性质的影响，包括散装介质的组成和粘度以及颗粒的初始尺⼨分布。不断增加的压⼒和处理循环会降低颗粒尺⼨和多分散性指数(PDI)，但也会导致封装效率降低。脂质体用于抑菌的作用机理与应用。
脂质体中辅助脂质中性脂也经常被用作阳离子脂质体的助手。例如，已知中性脂质1,2-二油基-asn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)在胞吞作用后参与内体逃逸，胆固醇(一种内源性脂质)可以插入脂质双层之间以增加纳米颗粒的刚性。为了增加体内稳定性，一种非常普遍的方法包括插入聚乙二醇(PEG)偶联的中性脂质，对纳米颗粒进行聚乙二醇化。此外，中性辅助性脂质，如DOPE已被用于提高阳离子脂质体的递送效率。DOPE提高核酸递送效率的生物物理机制仍在研究中。**近的一项研究报道，含有DOPE的脂质单层呈现不规则的豆状结构域，而缺乏DOPE的脂质单层呈现均匀的表面。除DOPE外，其他中性脂质，包括N-十二烷酰基肌氨酸，已被报道可提高阳离子脂质体的基因递送效率。由于在巨噬细胞上发现了甘露糖受体， 因此甘露糖已被用于修饰阳离子脂质体以靶向巨噬细胞递送。吉林北京脂质体载药
脂质与生物活性小分子(如叶酸)的结合已被研究用于靶向递送核酸。吉林北京脂质体载药
4PEG2000在脂质体中的作用
PEG2000是一种聚乙二醇（PEG）衍生物，常用于脂质体的表面修饰。它在脂质体中具有多种作用：1.稳定性增强：PEG2000可以在脂质体表面形成一层稳定的水合层，防止脂质体的聚集和沉淀，从而提高其在溶液中的稳定性。2.血液循环延长：脂质体表面修饰PEG2000可以降低脂质体被吞噬的速度，延长其在血液循环中的半衰期，从而增加药物的生物利用度。3.免疫原性降低：PEG2000可以掩盖脂质体表面的亲水性基团，减少脂质体与免疫系统的识别和***，降低免疫原性，提高脂质体的生物相容性。4.药物释放调控：PEG2000修饰的脂质体可以通过改变PEG链的长度和密度来调控药物的释放速率和方式，实现对药物的精确控制释放。在Doxil和Onivyde中，甲氧基peg(Mw2000Da)与DSPE(MPEG-DSPE)共价结合，提供了“隐形”和空间稳定的脂质体。PEG的分⼦量和PEG-DSPE在脂质组成中的摩尔百分⽐对双层填料、循环时间和热⼒学稳定性有重要影响。⾼分⼦量的PEG(>2000Da)移植到脂质头群上，表现出来⾃脂质体表⾯的排斥⼒，并保护脂质体不与⾎清蛋⽩结合，避免被单核吞噬系统(MPS)进⼀步***，但也减少了靶细胞对脂质体的相互作⽤和内吞作⽤。 吉林北京脂质体载药
