脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。 当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。北京快速制作脑梗MCAO模型水迷宫
SD大鼠MCAO模型作为世界上*通用的模型之一,在其制作时为了达成较高的成功率也需要不断的探索和努力,我们再次总结了难点和问题点,希望这篇文章可以为大家制备模型提供参考。 (1)麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。 (2)血管分离,在分离右侧CCA、ECA、ICA时,要注意迷走神经的保护, 减少对迷走神经的损伤, 尽量避免对迷走神经的直接牵拉。 (3)术中状态监护,例如发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。 (4)手术视野,可以制备金属勾,用橡皮筋缠绕连结金属钩固定在固定板上,从而使手术切口左右上下拉开,扩大手术视野。上海脑梗MCAO模型周期短外包公司通常拥有专业的实验团队,他们具备丰富的经验和专业知识,能够确保实验的准确性和可靠性。
脑梗MCAO模型成功的评判方法 生物化学指标的检测:在实验过程中,检测血清中C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等生物化学指标的变化。这些指标可以反映炎症反应和缺血损伤的程度,有助于评估模型的成功。 病理学检查:实验结束后,对实验动物的大脑进行病理学检查。观察大脑皮质和海马区的细胞形态、排列情况,评估神经细胞的损伤程度。同时,通过免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,以评估神经元损伤的程度。 行为学评估:在实验过程中,对实验动物进行行为学评估,如Morris水迷宫实验、步态分析等。通过比较不同处理组的行为学表现,评估模型的成功。 综上所述,评判脑梗MCAO模型成功的标准包括脑梗死面积、神经功能缺损评分、梗死血管、生物化学指标、病理学检查和行为学评估等方面。只有当这些指标均符合预期结果时,才能认为模型制备成功。
脑梗MCAO模型成功的评判方法主要包括以下几个方面: 1.脑梗死面积的评估:通过TTC(2%,17分钟)染色法对脑梗死面积进行分析和量化。在染色后,利用ImageJ图像分析软件对切片进行处理,从而得到脑梗死面积的数据。实验过程中,通过比较不同处理组之间的脑梗死面积,可以评估模型的成功率。 2.神经功能缺损评分:参照Zea-Longa评分标准,对实验动物在再灌注期内的神经功能进行评估。评分越高,表示神经功能缺损越严重。通过对不同处理组的神经功能缺损评分进行比较,可以进一步验证模型的成功。 3.梗死血管的观察:通过激光多普勒血流仪检测相对脑血流动脉减少情况,评估梗死血管的狭窄程度。同时,观察血管造影剂在梗死区域的分布情况,以判断血管阻塞的效果。实验外包团队可以根据科研人员的需求,设计并执行各种实验。
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机。北京本地脑梗MCAO模型水迷宫
发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。北京快速制作脑梗MCAO模型水迷宫
脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态,可导致脑损伤。数据显示,脑缺血性疾病约占所有脑血管疾病的80%。根据缺血区域可分为局灶性和全脑性缺血,根据病因可分为血栓型、栓塞型和低灌注型。阻塞大脑中动脉(MCA)及其分支的技术*接近该疾病临床病理表现,大脑中动脉是其在人类缺血性中风中*常受到影响的大脑血管。在闭塞性MCA中风模型中,使用*广*的模型通过短暂或永jiu性大脑中动脉栓塞(MCAO)在顶叶皮层和纹状体中产生局灶性*变。MCAO模型的诱导包括暂时闭塞颈总动脉(CCA),将缝合线引入颈内动脉(ICA)或经横断的颈外动脉(ECA),并收紧缝合线直到其中断向MCA的血液供应。 北京快速制作脑梗MCAO模型水迷宫