代谢组研究对二代测序结果的验证与拓展
验证基因表达调控效果:二代测序得到的转录组信息反映的是基因表达层面的情况,而代谢组中代谢物的实际含量变化可以直观地验证基因表达调控是否真正落实到了代谢环节。例如,转录组测序显示某脂肪酸合成途径的多个基因转录下调,若代谢组分析中相应的脂肪酸及其前体代谢物含量确实减少,就说明基因表达的改变确实引发了代谢过程的相应调整。
拓展功能机制认知:代谢组数据能呈现出生物体在特定状态下复杂的代谢网络变化,这可以帮助我们发现一些二代测序单纯从基因层面难以察觉的信息。比如某些代谢物可以作为信号分子反馈调节基因表达,这种代谢对基因的反向调控机制只有结合代谢组和二代测序相关分析才能完整揭示,从而拓展对整个生命活动调控机制的理解。 二代测序产出的数据量有多少?浙江二代测序流程
二代测序应用于蛋白组测序的常见方式②?
结合质谱技术的联合分析
原理:质谱技术是目前蛋白组学中鉴定和分析蛋白质的**技术。它可以将蛋白质酶解成肽段后进行离子化,然后根据不同肽段在质谱仪中的质荷比等特征来确定肽段的序列,进而推导出蛋白质的序列信息。二代测序在这里的作用是辅助质谱分析,比如对样本进行转录组测序,获得基因序列信息,帮助构建蛋白质序列数据库。当质谱检测到肽段后,可以基于这个参考数据库更精细地匹配和鉴定出对应的蛋白质,同时也有助于分析蛋白质的可变剪接产生的异构体等复杂情况。
应用案例:在**研究中,获取**组织和相邻正常组织样本。先通过二代测序构建该组织对应的转录组序列数据库,然后利用质谱分析**组织中的蛋白,借助之前构建的数据库,能够准确鉴定出许多在**中特异性表达或表达量发生***变化的蛋白质,进一步研究这些蛋白质在**发***展中的作用,像发现某些参与细胞信号转导通路的蛋白出现异常表达,可能与肿瘤细胞的增殖、转移等特性相关。 湖南嘉安健达二代测序价格RNA测序也是二代测序。
chip-seq的应用领域
转录因子结合位点分析:可以精确地鉴定特定转录因子在基因组上的结合位点,帮助研究人员了解转录因子的调控网络和基因表达调控机制。
表观遗传学研究:用于分析组蛋白修饰(如 H3K4me3、H3K27ac 等)和 DNA 修饰(如 5mC)在基因组中的分布,揭示这些修饰与基因表达和染色质状态的关系。
疾病研究:通过比较疾病样本和正常样本之间的差异,找到与疾病发生和发展相关的基因和调控因子,为疾病的诊断、***和药物研发提供靶点。
基因调控网络构建:鉴定转录因子和其他调控因子与基因组上的相互作用,构建基因调控网络,理解基因调控的复杂性和调控因子之间的协同作用。
基因组重构和进化研究:通过比较不同物种之间的转录因子结合位点和组蛋白修饰位点的保守性和变异性,揭示基因组的进化模式和基因调控的演化过程。
二代测序在代谢组研究中的应用途径②
调控元件测序辅助代谢组分析
原理:除了对编码基因的转录组测序外,二代测序还可用于分析非编码RNA(如miRNA、lncRNA等)以及基因的调控元件(如启动子、增强子等)。miRNA可以通过与靶mRNA结合抑制其翻译或促使其降解,间接调控代谢相关基因的表达,从而影响代谢组的构成。启动子等调控元件的甲基化状态等表观遗传变化也会改变基因的转录活性,**终对代谢过程产生作用。
案例:在**代谢研究中,通过对**组织和正常组织的miRNA测序,发现特定miRNA在**组织中表达异常。进一步研究表明该miRNA可靶向调控参与葡萄糖代谢的关键酶基因,使得肿瘤细胞中葡萄糖代谢模式发生改变,代谢组分析也证实了相关糖类代谢物的异常积累,为揭示肿瘤细胞独特的代谢特征提供了线索。 二代测序可以应用在哪些方面?
什么样本可以做二代测序?①
1、血液样本
全血:这是最常见的样本类型之一。血液中含有白细胞,其细胞核内有完整的基因组DNA。通过提取白细胞中的DNA,可以进行全基因组测序、全外显子组测序等。例如,在遗传病的基因诊断中,抽取患者的全血,提取DNA后,对与疾病相关的基因或整个外显子组进行测序,以寻找致病突变。
血浆/血清:其中含有游离的DNA(cfDNA)和RNA(cfRNA)。在**患者中,肿瘤细胞会释放其DNA片段进入血液循环,这些cfDNA被称为循环**DNA(ctDNA)。通过对血浆中的ctDNA进行测序,可以实现**的早期筛查、***过程中的动态监测等。例如,对于肺*患者,检测血浆中的ctDNA来追踪**的基因突变情况,为靶向***提供依据。 基因组重测序是二代测序吗?重庆哪里有二代测序
二代测序是为了改进一代测序通量过低的问题而出现的。浙江二代测序流程
转录组测序的主要测序对象包括以下几类(下):
长链非编码RNA(lncRNA):lncRNA长度较长,具有多种生物学功能,如参与基因表达调控、染色质修饰、转录因子活性调节等。转录组测序有助于发现和鉴定新的lncRNA,并分析其在不同组织和细胞中的表达模式及功能机制。其他RNA
环状RNA(circRNA):circRNA是一类特殊的非编码RNA,呈环状结构,具有稳定性高、不易被降解等特点。转录组测序可以检测circRNA的存在和表达水平,研究其在基因表达调控、细胞信号转导以及疾病发***展中的作用。
小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA):snRNA主要参与真核生物mRNA的加工过程,如mRNA的剪接等;snoRNA则主要参与rRNA的加工和修饰。转录组测序可以对它们的表达和功能进行研究,以揭示其在细胞内的作用机制。 浙江二代测序流程