陕西靠谱的HE染色分析

HE染色原理1、细胞核染色的原理：苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点（4.7—5.0）以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。HE染色试验技术及注意事项。陕西靠谱的HE染色分析

HE染色观察肝脏HE染色切片，首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜，调准焦螺旋至视野清晰，可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少，小叶分隔不明显，但动物如猪或小鼠，其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉，在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列，称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下，肝细胞内染色为蓝色的是细胞核，细胞核大而圆，居中，异染色质少而着色浅，能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富，多成嗜酸性，当蛋白质合成旺盛时，胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网，等等，但是在光镜下是无法看到的，需要在电镜下才能观察到。当然，肝小叶内除了肝细胞，还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态，但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整，以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。湖北质量好的HE染色检测HE染色，优先南京英瀚斯生物。

HE染色等常规染色，组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因：石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好，并且对抗原基本无影响。脂质染色（油红O染**odipy染色，尼罗红染色）必须做冰冻切片，不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色，胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片，将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定（在固定液内边解冻边固定）。组织形态结构保存完好顺序：新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片＞组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片＞新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片＞组织-80°冷冻后直接冰冻切片。

HE染色常见问题：Q5：细胞核呈棕红色改变答：苏木素染液过度氧化；或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8)，或在稀释的氨水溶液，或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡，这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6：伊红染色较淡答：伊红的PH改变了(PH可能已大于5)；或反蓝液体未漂洗干净，残留后影响胞浆嗜酸性染色；或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策：检查伊红染色液PH，可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示，调整实验步骤。HE染色小攻略技巧分析。

HE染色细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。着***况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是形态学比较常用的染色方法。新疆比较好的HE染色服务

冰冻组织切片的HE染色。陕西靠谱的HE染色分析

HE染色脱蜡不净的原因及验证方法：1)二甲苯使用过久，含蜡成分太高或脱蜡效果差：可更换二甲苯验证。2)切片经烤片，冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低；延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少，幅度太小；可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久，导致乙醇中二甲苯含量过高，二甲苯残留在切片上（由于二甲苯与水不相溶，切片上有二甲苯的地方，苏木精就没有办法渗透进去，在切片染色完成后留下了点状的不着**域）：更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳（偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符）：换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错：需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错：需重新配置验证。8)烤片时间短，切片上水分没有烤干，也会导致着色不匀，出现点状发白区域。陕西靠谱的HE染色分析