培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。MCDB 131培养基除用于内皮细胞外,还可用于其它细胞类型,如肝细胞、平滑肌细胞、心肌细胞等。江苏实验细胞培养基生产产家

在细胞培养实践中,选择合适的 DMEM 培养基至关重要。对于生长较快、粘附性低的细胞,如某些肿瘤细胞和杂交瘤细胞,高糖型 DMEM 培养基是理想之选,其高浓度葡萄糖能充分满足这类细胞对能量的高需求,促进细胞快速生长。而对于一些原代细胞,因其对培养环境更为敏感,可能需要低糖型 DMEM 培养基,并根据细胞来源和特性添加特定的生长因子、营养补充剂等,定制专属培养方案,为原代细胞提供**适宜的生长条件,提高原代细胞培养的成功率。甘肃华晨阳细胞培养基检测DMEM 含多种无机盐,维持细胞内外渗透压与离子平衡 。

Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。
含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡盐溶液溶解)与合成培养基(如MEM细胞培养基)以1:1的比例混合使用。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。目前,血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份复杂,批间差异大及存在病毒等外源污染风险,对下游生物制品的分离纯化和安全性都存在较大的影响,在生物制药行业的使用也越来越少。因此,基于对血浆成份的分析,合成细胞培养基应运而生。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM)。即开即用液体配方,DMEM/F12节省配制时间,提升实验效率。

Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子等。DMEM培养基初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,其中,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 DMEM/F12培养基常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。河南实验细胞培养基源头直供
MCDB131是MCDB培养基的一种,是由Knedler和Ham设计开发出来的,初用于培养人微血管内皮细胞(HMVEC)。江苏实验细胞培养基生产产家
RPMI-1640细胞培养基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美国纽约州法罗市的罗斯韦尔公园纪念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)开发出来的,RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基,1640是培养基代号。
我们提供多种组分的RPMI1640改良培养基。RPMI-1640细胞培养基L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养元素,但其在溶液中不稳定,会自发降解,不含L-谷氨酰胺的培养基,可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。 江苏实验细胞培养基生产产家
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