激酶是重要的药物靶点,其活性检测是药物筛选的关键。均相发光技术,尤其是TR-FRET和Alpha技术,为此提供了理想平台。以TR-FRET为例:将待测激酶、底物肽、ATP与待筛选化合物共同孵育。体系中包含两种抗体,一种针对磷酸化底物(带供体标记),另一种针对底物肽的标签(带受体标记)。只有当激酶活性正常,底物被磷酸化后,两个抗体才能同时结合到底物肽上,使供受体靠近产生FRET信号。若化合物能抑制激酶,则磷酸化水平下降,FRET信号减弱。这种方法无需分离,可直接在含有ATP、激酶和化合物的混合液中实时或终点法检测,通量极高,是发现激酶抑制剂的主流手段。均相化学发光在体外诊断领域的应用范围有多广?天津浦光生物均相发光应用领域

研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等生物分子间的相互作用,对于理解生命过程至关重要。均相化学发光技术,特别是Alpha技术,为PPI研究提供了强大的定量平台。通过将相互作用的双方分别与供体珠和受体珠偶联,可以直接在溶液生理条件下测量结合信号。该方法不仅可以验证互作,还能通过竞争实验测定小分子抑制剂的IC50,或通过滴定实验估算结合常数(KD)。相较于传统的表面等离子共振(SPR)或等温滴定量热法(ITC),均相化学发光方法通量更高,样品消耗更少,更适合于大规模筛选和初步的相互作用表征。山东体外诊断均相发光应用领域体外诊断新机遇!均相发光新产品,助您抢占先机!

组蛋白修饰酶(如甲基转移酶、去甲基酶、乙酰转移酶、去乙酰化酶)是**、神经疾病等领域的热门靶点。均相化学发光技术为这些酶活性的检测和抑制剂筛选建立了成熟平台。以组蛋白甲基转移酶为例,通常使用生物素标记的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)类似物作为甲基供体。酶反应后,生物素标记的甲基被转移到组蛋白底物上。然后,使用针对甲基化位点的抗体(偶联供体珠)和链霉亲和素(偶联受体珠)通过Alpha技术检测,信号强度与酶活性成正比。这种方法灵敏度高,抗干扰能力强,可直接在含有化合物和辅因子的混合体系中进行筛选。
细胞水平的功能性检测是药物筛选和生物学研究的基础。均相化学发光为此提供了多种稳健的检测方案。比较经典的是基于ATP含量的细胞活力/增殖/毒性检测。活细胞内的ATP与荧光素酶-荧光素反应直接偶联,产生化学发光信号,其强度与活细胞数成正比。该方法操作简单(一步加样裂解/检测),灵敏度高,线性范围宽。此外,针对细胞凋亡,可通过检测Caspase酶活性(使用化学发光的Caspase底物)或膜磷脂酰丝氨酸外露(使用与化学发光检测偶联的Annexin V类似物)来进行均相分析。这些方法均实现了在微孔板中对细胞状态的快速、定量评估。均相化学发光在全球体外诊断市场的竞争态势如何?

在传染病诊断领域,均相发光技术主要用于抗原或抗体的高灵敏检测。例如,利用TR-FRET原理,可以设计检测病毒抗原的均相免疫分析。将针对病毒抗原不同表位的两种抗体分别标记供体和受体,样本中若存在病毒抗原,则形成免疫复合物并产生FRET信号。该方法快速,可用于病原体筛查。在病毒学研究中,均相发光可用于评估病毒进入(如基于荧光素酶的报告病毒)、病毒复制或抗病毒药物的效果。其高通量特性有助于快速筛选广谱抗病毒化合物。浦光生物均相化学发光新技术!天津干式化学发光均相发光技术
临床检测新利器!肝素结合蛋白(HBP)检测试剂盒(均相化学发光法),为医疗保驾护航!天津浦光生物均相发光应用领域
尽管优势明显,均相发光技术也存在一些挑战和局限性。首先,某些技术(如FRET)可能受到样本自身颜色(如血红蛋白)、浊度或某些化合物(如具有强荧光或淬灭特性的药物)的光学干扰。其次,均相检测通常对试剂的特异性和纯度要求极高,任何非特异性结合或聚集都可能导致假阳性信号。第三,开发均相检测方法需要进行复杂的探针设计和标记优化,前期开发成本较高。比较后,对于某些极低丰度的靶标,其灵敏度有时可能仍低于经过多步洗涤和信号放大的异相方法(如化学发光免疫分析CLIA)。天津浦光生物均相发光应用领域
在重症炎症(如脓毒症)、CAR-T诊疗或某些自身免疫病中,细胞因子风暴是危及生命的状态,需要快速监测多种炎症因子。基于微球阵列的均相化学发光多重检测技术,能够从单份微量血清或血浆样本中,同时定量检测IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十几种关键细胞因子的浓度。这种高通量、多参数的分析能力,使得临床医生或研究人员能够多方面、快速地掌握患者的炎症风暴谱系,评估严重程度,并监测诊疗干预(如抗细胞因子抗体)的效果,为精细免疫调控提供依据。均相化学发光与荧光免疫技术相比,优势在哪?广东浦光生物均相发光免疫诊断试剂研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等生物分子间的相互作用,对于理解生命过程至关重要。...