本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了***的应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应***物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，***模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。口腔拭子是一个形状长得跟牙刷很像的拭子。江西口腔拭子以客为尊
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本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。
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然后将沾有口腔脱落细胞的拭子在洁净通风处、至少一小时直至晾干，装回采集管，完成取样。江西口腔拭子以客为尊
⑴尼龙植绒拭子。（用于采样，释放量高达90%以上）三、产品特点：①采用国际通用的方便***的纸塑包装。②γ射线***，确保无菌。③大包装盒内的每套独立包装，方便使用。④针对不同的标本类型选用了不同的保存液。采样管（细菌、***、支原体、衣原体）产品优势：1、采集拭子特点：采集系统采用尼龙植绒拭子，对微生物***害，能程度的增加标本的采集及释放量。深圳市华晨阳科技有限公司，大量临床实验表明：与普通无菌棉拭子相比，尼龙植绒拭子有着更好的对临床微生物标本的采集与运送效果.尤其是对于那些不能及时送检、放置时间过长的标本而言更是如此。拭子的优势：①独有的喷射式植入尼龙纤维技术，增加标本的采集及释放量。②拭子全长，塑料杆上有独特的可折断设计。③绒毛质地可采集更多目标分析物。④没有标本残量，加快标本过程处理。⑤拭子为***独立包装。独立包装的无菌拭子尼龙植绒拭子已经具有远超传统拭子的优越性能。由于其具有超常的吸水能力，可以将其表采集的微生物的恢复率由传统的20%高到了60%由于对收集到的微生物有超过90%的释放率，取样拭子确保了结果的高度可靠性。这一产品标志着一个重大的突破，因为它是市场上的个可以用于环境控制定量分析的拭子。江西口腔拭子以客为尊
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