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转录组测序企业商机

问:能否用FPKM进行差异分析?

答:在做差异分析时,我们是采用readcount数据,通过DESeq或者TMM标准化后,进行差异分析。FPKM实际上也是对readcount进行标准化处理的一种方法,各种标准化方法优劣势比较见下图(Dillies, M. A. et al, 2013),可以看出,在进行差异分析时,DESeq和TMM的标准化效果比较好,FPKM的标准化效果较差,所以,不推荐使用FPKM进行差异分析。

问:为什么要用校正后的p值,能直接用p_value吗?

答:校正后的p值(padj/qvalue),是对p值进行了多重假设检验,能更好地控制假阳性率 全转录组测序服务哪里好找上海融享生物。贵州转录组测序公司哪里有

通过比较处理组和参考组,对差异表达基因进行聚类分析,可以很直观反映出不同实验条件下样本差异表达基因的变化情况。我们利用R软件,对差异表达基因和不同样本/实验条件同时进行分层聚类分析。

Gene Ontology(简称GO)是一个国际标准化的基因功能分类体系,提供了一套动态更新的标准词汇表(Controlled Vocabulary)来描述生物体中基因和基因产物的属性。GO总共有三个Ontology,分别描述基因的分子功能(Molecular Function)、细胞组分(Cellular Component)、生物过程(Biological Process)。 贵州LncRNA转录组测序转录测序等技术服务找融享生物专业又高效。

另一个重要的因素就是测序数据量的大小(即测序深度)。但是比较好的测序数据量并没有一个固定的值,而会因为目标转录组的复杂度的不同而不同。一些人认为5M 的mapped reads 足够对转录组中的中度及高度表达的转录本进行精确定量了。但是对低丰度的转录本的定量则需要更高的测序深度,而过高的测序深度所带来的转录本的噪声也可能影响定量的准确性。在对转录组的整体评估中,饱和曲线可以较好的评估测序深度是否合适。所以转录组找融享生物性价比高,周期短。

转录组测序技术(RNA-seq)经历测序技术的发展,目前几乎已经成为了各种生物学研究的基础,无论是疾病机制研究、生理调控等均有广泛应用。

环状RNA测序(circRNA):由于环状RNA的闭合环状特性,通过去除totalRNA中的rRNA和线性RNA分子,可以特异地富集环状RNA分子后测序,更有针对性地分析受检样本中特定的环状RNA谱、环状RNA剪接模式、组间差异和分子功能等。CircRNA功能众多,可作为miRNA的海绵,竞争性结合miRNA,发挥ceRNA的调控功能,调控基因表达。近年来还发现与疾病的发生和发展密切相关,在疾病诊断标记物等方向具有很大的应用前景。 全转录组测序服务 cirRNA可单独建库测序找融享生物。

转录组测序(Transcriptome sequencing)是通过二代测序平台快速地获得某一物种特定细胞或组织在某一状态下的几乎所有的转录本及基因序列,可以用于研究基因表达量、基因功能、结构、可变剪接和新转录本预测等。目前,转录组测序已经被很多人应用于基础研究、临床诊断和药物研发等领域。

RNAseq:也叫全转录组测序,是利用高通量测序技术对由mRNA逆转录生成的cDNA序列进行测序,从而获得样品中的RNA信息,各种类型的转录本都可以用深度测序技术进行高通量检测,统称做RNAseq 融享生物专注于微生物检测服务和转录组测序如果你有需要可以找融享生物。北京LncRNA转录组测序机构哪家好

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将各样品过滤后的测序序列与参考基因组进行比对(mapping),使其定位到基因组。 本项目分析中,我们使用HISAT2软件进行mapping。参考基因组为Rattus_norvegicus。所用的软件为HISAT2。HISAT采用全局和局部搜索的方法能够有效的比对到RNA Seq测序数据中的spliced reads,是目前比对率比较高 且比较准确的比对软件。在分析过程中,采用软件默认参数


HISAT2的算法主要分为三个部分:

将测序序列整段比对到基因组单外显子

将测序序列分段比对到基因组的两个外显子上

将测序序列分段比对到基因组三个以上(含三个)外显子


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