可变剪接是调节基因表达和产生蛋白质组多样性的重要机制,也是RNA-seq的重要分析内容,常见的可变剪接形式为SE,SE事件形成过
GO 的基本单元是 Term,每个 Term 有一个单独的标示符(由 “GO:” 加上7个数字组成,例如 GO:0072669);每类 Ontology 的 Term 通过它们之间的联系( is_a, part_of, regulate)构成一个有向无环的拓扑结构。GOSlim 是缩减版的 GO 术语,它提供了 GO 注释的概述性结果。
京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)是一个整合了基因组、化学和系统功能信息的数据库。把从已经完整测序的基因组中得到的基因目录与更高级别的细胞、物种和生态系统水平的系统功能关联起来是KEGG数据库的特色之一。KEGG 注释主要包括:(1)KO (KEGG Ortholog)注释,即将分子网络的相关信息进行跨物种注释; (2)KEGG Pathway 注释,即代谢通路注释,获得物种内分子间相互作用和反应的网络 全转录组测序服务利用三代单分子实时测序技术,无需对RNA进行打断和拼接,即可直接获得完整的全长转录本。陕西cirRNA转录组测序哪里有
问:能否用FPKM进行差异分析?
答:在做差异分析时,我们是采用readcount数据,通过DESeq或者TMM标准化后,进行差异分析。FPKM实际上也是对readcount进行标准化处理的一种方法,各种标准化方法优劣势比较见下图(Dillies, M. A. et al, 2013),可以看出,在进行差异分析时,DESeq和TMM的标准化效果比较好,FPKM的标准化效果较差,所以,不推荐使用FPKM进行差异分析。
问:为什么要用校正后的p值,能直接用p_value吗?
答:校正后的p值(padj/qvalue),是对p值进行了多重假设检验,能更好地控制假阳性率 天津LncRNA转录组测序服务转录测序技术服务靠谱公司上海融享生物科技有限公司多年技术服务经验更放心。
将各样品过滤后的测序序列与参考基因组进行比对(mapping),使其定位到基因组。 本项目分析中,我们使用HISAT2软件进行mapping。参考基因组为Rattus_norvegicus。所用的软件为HISAT2。HISAT采用全局和局部搜索的方法能够有效的比对到RNA Seq测序数据中的spliced reads,是目前比对率比较高 且比较准确的比对软件。在分析过程中,采用软件默认参数
HISAT2的算法主要分为三个部分:
将测序序列整段比对到基因组单外显子
将测序序列分段比对到基因组的两个外显子上
将测序序列分段比对到基因组三个以上(含三个)外显子
问:Read-1,Read-2的具体含义是什么?答:双端测序会在cDNA片段的两端先后读取一定长度的碱基(如pe150,就是分别测150bp)得到一对reads,其中一条称为Read-1,另一条称为Read-2。大量文献和实际项目都表明,转录组分析中使用双端reads对于序列拼接和定量都大有裨益。
基因表达水平一般是通过该基因转录的mRNA的多少来衡量的。每个基因转录产生的mRNA的量,是受到时空等多种因素调控的,个体在不同的生长发育阶段,或者不同的组织水平,或者响应不同的实验处理,基因转录出mRNA的量都是不一样的。我们通过featurecounts(Liao Y, Smyth GK and Shi W., 2014)软件统计基因的表达量。 融享生物是提供转录组测序,宏基因组,16SITS等扩增子服务商之一。
转录组测序(Transcriptome sequencing)是通过二代测序平台快速地获得某一物种特定细胞或组织在某一状态下的几乎所有的转录本及基因序列,可以用于研究基因表达量、基因功能、结构、可变剪接和新转录本预测等。目前,转录组测序已经被很多人应用于基础研究、临床诊断和药物研发等领域。
RNAseq:也叫全转录组测序,是利用高通量测序技术对由mRNA逆转录生成的cDNA序列进行测序,从而获得样品中的RNA信息,各种类型的转录本都可以用深度测序技术进行高通量检测,统称做RNAseq 有关微生物基因组测序,转录组测序服务及其他测序服务就找融享生物。云南比较转录组测序公司哪家好
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可以提供测序读长为75*2 bp, 每次运行数据量达50-60GB。对于4-5Mb的基因组,可确保每个基因组测序量达到400Mb(100倍覆盖),足以满足全基因组denovo测序和SNP鉴定的需要。Solexa高通量测序平台均可对转录组进行测序,由于两种平台各有其优缺点,针对不同的样品情况,需灵活选用。Illumina测序技术的优点是单次测序获得的数据量大,能够得到更高的覆盖率,检测到更多低丰度的转录本,在已知基因组序列物种的转录组分析中更具优势。
Roche 454测序技术的优点是单序列读长可以达到500bp,在未知基因组序列物种的转录组分析中更有优势,其较长的读长便于拼接,能获得更好的转录本数据。 陕西cirRNA转录组测序哪里有
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