复合探针结合了分子信标和杂交探针的优点，由 荧光探针和淬灭探针组成，荧光探针长 25 个碱基左 右，5'端标记荧光基团，3'端磷酸化防止被延伸，淬
灭探针长 15 个碱基左右，3'端标记淬灭基团。当没 您知道上海融享生物科技有限公司的qPCR都有哪些吗？河北实时荧光qPCR公司哪家好
有模板存在时，2 个探针结合形成复合探针，荧光探 针发出的荧光被淬灭探针吸收，无荧光产生; 当有模 板存在时，由于荧光探针与模板完全互补，荧光探针 优先与模板结合，2 个探针分离，产生较强荧光。荧 光强度与 PCR 体系中模板数量成正比，可进行 PCR 定量。该方法的优点是使用非荧光淬灭剂，本底低， 对扩增效率影响小，探针设计、合成、标记、纯化方便， 而且探针特异性较强、灵敏度较高，可以用来鉴别单 碱基变异。Absolute Quantification法也称作标准曲线法，是一种利用已知的标
准曲线来定量未知样本目的模板起始量的方法。以 5 点梯
度稀释所得的标准品为模板，经实时荧光定量 PCR 扩增，以
目的模板初始拷贝数的对数为横坐标，检测到的 CT 值为纵
坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程，将未知样本的 CT
值带入该方程即可计算出目的模板的起始量。标准曲线的各
项指标：斜率、扩增效率（E）、相关系数（R2
）、间距均需进行
严格评价，从而确保该曲线的可用性。 河北实时荧光qPCR公司哪家好上海融享生物科技有限公司专业致力于qPCR项目。
实时荧光定量 PCR 技术的方法学：所谓 real-time
Q-PCR 技术，是指在 PCR 反应体系中加入荧光基团，
利用荧光信号累积实时监测整个 PCR 进程，后来通过
标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在
real-time 技术的发展过程中，两个重要的发现起着关
键的作用：①在 20 世纪 90 年代早期，Taq DNA 多聚
酶的 5’核酸外切酶活性的发现，它能降解特异性荧光
标记探针，因此使得间接的检测 PCR 产物成为可能。
②此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中
能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应
的仪器和试剂的商品化发展导致 real-time Q-PCR 方法
在研究工作中的运用。
聚合酶链反应( PCR) 技术自 1985 年问世以来， 以其灵敏性高、特异性强和速度快在分子生物学等科 研领域得到了广泛应用。但是，由于传统的 PCR 技 术不能准确定量，在操作过程中易受污染而使假阳性
率偏高; 因此，使其应用受到限制。实时荧光定量 PCR 技术拥有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量 准确、速度快、全封闭反应等优点，已成为了分子生物
学研究的重要工具。
实时荧光定量 PCR 技术，是指在 PCR 反应体系 中加入荧光基团，利用荧光信号的累积实时监测整个 PCR 进程，后来通过标准曲线对未知模板进行定量
分析的方法。 根据您的具体需求选择不同的qPCR。
实时荧光定量 PCR 技术是在传统 PCR 技术上发展而来的，不仅能判断某一基因的有无，而且还能对其进行定量分析。由于该
技术与常规 PCR 相比，能够进行实时监测、自动化程度高而被广大研究者青睐。本文对实时荧光定量 PCR 的原理、数据分析、定量方法、分
类以及应用进行了系统而详细的综述。
实 时 荧 光 定 量 PCR 与 常 规 PCR 相 比，主 要 体 现 在 荧
光、实时与定量 3 个关键词上。荧光是指在标准 PCR 体系中
加入了荧光物质；实时是指通过荧光信号的积累能够实时
监测每次循环后 PCR 产物的变化，并生成荧光扩增曲线；定
量是指该技术能够实现对初始模板的定量分析。 qPCR的多种项目总有一款是您满意。陕西实时荧光qPCR公司哪家好
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分子信标(molecular beacons)是TaqMan 探针的衍生形式它的主要缺点是 :① 杂交时探针不能完全与模板结合 , 因此稳定性较差。 ②探针合成时标记较复杂(蔡霞, 2005)。目前 , 分子信标技术已应用于 SNPs 分析 、基因定量分析 、 疾病基因检测与诊断等生物领域 , Bauerfeind 等 (1996)利用分子信标技术对绵羊 、山羊和牛的副结 核分枝杆菌做了分子鉴定;John 等(2007)通过分子 信标检测猪病病原体 ,证明了该方法比常规 PCR 具 有更高的敏感性 。分子信 标特别适用于检测点突变 , 能区分只有一个核苷 酸差异的不同 DNA 序列 ,而且其敏感性远比同等 长度的寡核苷酸探针要高 。河北实时荧光qPCR公司哪家好
上海融享生物科技有限公司属于医药、保养的高新企业，技术力量雄厚。上海融享生物是一家有限责任公司企业，一直“以人为本，服务于社会”的经营理念;“诚守信誉，持续发展”的质量方针。以满足顾客要求为己任；以顾客永远满意为标准；以保持行业优先为目标，提供***的转录组，16S ITS，靶向甲基化， LncRNA转录测序。上海融享生物自成立以来，一直坚持走正规化、专业化路线，得到了广大客户及社会各界的普遍认可与大力支持。
