另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液,主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存液是直接裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase),如果用于RT-PCR较为合适,但裂解液可以灭活病毒,这种样本不能用于病毒的培养分离。
病毒保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等),不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂),以免影响PCR检测。 获得的DNA/RNA质量好,能得到较快的检测结果可完成各种病毒检测及分析实验如PCRqPCR等,同时节省运输成本。背景非灭活型病毒保存液厂家批发价
我们除了以上介绍的灭活型的病毒保存液外,还有非灭活的病毒保存液。含有Hank's液体、氯化钾、氯化镁、氯化钙、BSA等。多种联合,具有抗细菌和抗的作用;牛血清蛋白(BSA)作为蛋白稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hank's缓冲剂构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和稳定性。灭活型和非灭活型病毒保存液通常用于临床流感、禽流感、手足口病毒、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集和运送。国内灭活型病毒保存液价目表)采集病毒标本时应由专业人员严格按照采样程序进行,标本进行检测时,应在符合安全级别的实验室进行操作。
非灭活型的病毒采样管:
除了灭活型的病毒保存液,保存的病毒完整性更好,检出率更高,出了核酸检测外还可以用于其他研究。
灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势,目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank’s液基础,在这个基础上,添加了氯化钾,氯化镁和氯化钙等物质为致病菌提供必须的营养离子使之专一性更强、且保存时间更长,更大限度保存致病菌形态的完整性,提高致病菌提取率。
非灭活型的一次性病毒采样管的特点:
①、低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
②、适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等。
③、保存液中添加了氯化钾、氯化镁和氯化钙等物质为致病菌提供了必须的营养离子,使病菌专一性更强、且保存时间更长,可以更大限度保存致病菌形态的完整性,提高致病菌的提取率。
④、保存液中的成分可以有效防止细菌和污染。
由于病毒属于寄生生物,采样后体外就无法存活了,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中进行保存,为了保护病毒检测环境的安全和检测人员的安全,灭活病毒保存液其实是比较好的选择。
前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。
这也使得病毒的长期保存通常比细菌的保存更困难。其实大多数病毒耐冷不耐热,对热不稳定。
生物病毒是一种个体及其微小的生物,甚至比、细菌还要小得多,必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖,是一种非细胞型生物。因此,不论是灭活型还是非灭活型,采样之后,病毒都是只能存活很短时间的。如果没有病毒保存液,病毒在体外几分钟就会大量降解。采样管主要是用于病毒核酸检测的,所以灭活型的保存液虽然使病毒裂解了,但是里面添加的RNA酶抑制剂可以保护其核酸,实验时只要能检测出核酸就可以作出诊断了。
影响病毒保存时间还有一个重要的因素,那就是温度。一般来说,灭活型的保存液由于只需要保护核酸不被降解,在4摄氏度保存一周,-20摄氏度保存一个月,-80摄氏度保存一年。非灭活的保存液在取样后如果不能及时检测,务必要4摄氏度低温保存,保存时间不超过48小时,如果无法及时送往检测点的需要-70摄氏度温度以下保存。 而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测,所以在保存和运输时,就需要加入病毒保存液。河北病毒保存液批发价格
病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。背景非灭活型病毒保存液厂家批发价
病毒保存液使用注意事项。
①、 本产品为一次性产品,用于临床采集病毒标本的采集、运送和保存,超出预期用途不得使用。
②、 产品过有效期或者产品包装破损不得使用。
③、 采集病毒标本时应由专业人员严格按照采样程序进行,标本进行检测时,应在符合安全级别的实验室进行操作。
④、 禁止先用保存液浸润拭子后采样。
⑤、 禁止将已置入了病毒样本的保存液直接接触被采集人员。
⑥、标本采集后应当在3个工作日内运送至对应的实验室,保存温度为2~8 °C;如未能72h内送至实验室的,应当低温保存,标本应当避免反复冻融。 背景非灭活型病毒保存液厂家批发价
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