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市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。

前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和

5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。


病毒保存液,对于很多小伙伴们而言,这个名词是新奇的,殊不知它对于各种病毒的检测具有重要的意义。北京支原体保存液

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由于病毒属于寄生生物,采样后体外就无法存活了,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中进行保存,为了保护病毒检测环境的安全和检测人员的安全,灭活病毒保存液其实是比较好的选择。

前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。



广东DNA保存液品牌企业病毒存在不易保存和易的弊端,但灭活型病毒保存液完美解决了这一弊端。

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灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液体含有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸既可以做出诊断。而且能够在常温下保存相对较长的时间。

病毒的检测不同于常规的生化检测,病毒本身是一种结构简单的微生物,必须 寄生在活细胞内。采样后,病毒离开寄主细胞,在采样管内其蛋白质外壳和核酸都会很快降解,这样核酸检测时就无法判断初始采集的样本是否含有病毒,容易造成假阴性。

而不灭活的可以主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性,保护病毒蛋白质外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。

对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。 主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作员二次,但是又含有Rnase抑制剂。

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病毒保存液具体的保存时间应该要区分不同类型的保存液。通常在采样前,病毒保存液不管是灭活型的还是非灭活型的,都可以在常温下保存半年甚至是一年,但是在采样后保存时间是很短的。这是因为保存的时间更多情况并不是取决于保存液的质量,而是跟病毒或者是核酸本身的特性相关。

生物病毒是一种个体及其微小的生物,甚至比、细菌还要小得多,必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖,是一种非细胞型生物。因此,不论是灭活型还是非灭活型,采样之后,病毒都是只能存活很短时间的。如果没有病毒保存液,病毒在体外几分钟就会大量降解。采样管主要是用于病毒核酸检测的,所以灭活型的保存液虽然使病毒裂解了,但是里面添加的RNA酶抑制剂可以保护其核酸,实验时只要能检测出核酸就可以作出诊断了。 比如异地运输或邮寄标本,或样品太多无法按时进行检测等等,这时病毒保存液就起到了相当大的作用。唾液保存液按需定制

从采集完样品到开始检测,中间可能遇到各种问题,比如异地运输或邮寄标本。北京支原体保存液

次性使用病毒采样管主要用于测试样品的采集,运输和储存。病毒采样管套装主要是由拭子和病毒保存液的采样管组成。可以用于流感病毒、手足口病毒和其他病毒的微生物采样和运输。

一次性使用病毒采样管可以适用于什么方面呢?

①、一次性使用病毒采样管用于疾控中心和医院的临床部门的传染原微生物的监测和采样。它适用于流感病毒(普通流感,高致病性禽流感等)、手足口病毒和其他类型的病毒,也可以用于支原体和衣原体的采样;

②、一次性使用病毒采样管用于将鼻咽拭子样本或特定部位的样本从采样点运送到测试实验室,以进行聚合酶链反应的提取和测试;

③、还用于保存鼻咽拭子样本或特定部位的排列样本,以进行必要的细胞培养等等。 北京支原体保存液

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