样本准备注意事项:●采集的样本需要符合纳入标准:如年龄、肥胖(身高、体重)、血糖血脂血压、诊断情况等。●统一早晨空腹**,尽量避免样本间的差异影响。●如个别样本发生溶血,则弃掉。●样本编号用油性笔清楚地写在管壁及管盖上。●离心管在放入冰箱前,用封口膜密封。●如果提供的是冻存细胞株,需提供详尽的复苏方法。●细胞培养基必须使用去除exosome(de-exosome)的血清或者无血清培养基(例如ThermoFisher的SFM)。●分离外泌体前的样品不能加入任何RNA保护剂(如Trizol)。●分离好的外泌体如需进行电镜观察,需要放4°C保存,并且不宜保存太久。●全血建议使用PAXgene管保存,不可冻融,取血后尽早制备血浆或血清,血浆或血清可以-80°C保存,但应避免反复冻融。●储存条件以及储存时间影响外泌体得率,保存在-80℃冰箱中的样本,如果储存时间过长,外泌体产量也会***降低。●干冰运输应采用壁厚且质量完好的泡沫箱,24小时到达的,干冰数量不得低于5公斤;48小时到达的,干冰数量不得低于8公斤;夏季适当增加干冰(倍)。 云生物主营产品很多,包括外泌体抽提和测序。上海电镜外泌体活动
外泌体的基本信息:⊙外泌体的大小:外泌体的直径约40-150nm
⊙从研究上来讲并不太严格区分外泌体(exosomes)或微泡(microvesicles)
⊙外泌体属于胞外囊泡类,除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡
⊙外泌体的直接比微泡的要小,后者直径为100nm-1μm
⊙外泌体的数量:人体中大约有1014个,近乎于平均每个细胞产生1000-10000个
⊙外泌体的细胞源:人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体
⊙外泌体具有异质性,即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有很大功能区别
⊙外泌体的存在:外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中
⊙外泌体产生于细胞中的多泡体 天津提取试剂盒外泌体售后分析云生物主营业务包括外泌体抽提和测序。
UR51102外泌体**培养基。UR52121适用于细胞上清(尿液),可提取400ml细胞上清液。UR52126适用于尿液,可提取500ml尿液。UR52131适用于血清血浆,可提取20ml,应用于蛋白方向CHEM COMMUN-IF=6.2-糖基化-UR52136。UR52136适用于血清血浆,可提取30ml,应用于RNA方向。UR52141适用于提取体液,可提取60mlJ CELL MOL MED-IF=4.7-睾丸损伤-UR52101。UR52111适用于细胞上清液/尿液中外泌体的浓缩J CELL PHYSIOL-IF=4.5-白血病-UR52121。UR90102试剂盒配套纯化柱。UR52301适用于外泌体CD63和TSG101蛋白的检测。UR52302适用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用。UR52303适用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用。UR21017适用于***成像和示踪FRONT。UR33101适用于高效裂解外泌体蛋白,也可用于细胞裂解。UR52135适用于血清血浆,可提取5ml,应用于 RNA 方向。UR52130适用于血清或血浆,可提取6m。UR52100适用于细胞上清或者尿液,可提取100ml。UR52101适用于所有样本CANCER。
胸水:
(1) 临床收集胸水后若不能**时间处理,请于4℃临时保存(不得超过8 h);
(2) 将收集到的胸水1000 g离心10 min,收集上清液;
(3) 将得到的胸水上清3000 g离心10 min,收集上清;
(4) -80℃冰箱中保存。
腹水:
(1) 临床收集腹水后若不能**时间处理,请于4℃临时保存(不得超过8 h);
(2) 将采集到的腹水在4℃下(室温亦可)离心2000 g,20 min,去除腹水中的残渣;
(3) -80℃冰箱中保存。
胆汁:(1) 用无菌容器收集胆汁;
(2) 将收集到的胆汁在4℃下,3000 g离心10 min去除细胞沉渣和碎片;
(3) 收集胆汁上清液,4℃或者-20℃长期保存。
1、生物信息学、药物信息学:基因组数据全链条处理(无论哪种测序)、蛋白组代谢组个性化分析、根据委托方提供的参考文献和要求进行个性化特定分析、分子对接、药物筛选、量子化学计算;优势:深度理解科研需求、强大分析处理能力、多链条批量处理、快速获得研究靶点、指导科研方案纠偏,更好更快发表文章。《分子**学》是一份开放获取的国际期刊,重点介绍基础、临床和发现驱动的转化性**研究的新发现、方法和技术进展。工作重点是***提高我们对导致人类**发展的疾病过程的理解,并/或建立对**患者的诊断、预后和预防策略具有明确临床意义的新概念。主题包括但不限于:细胞周期等关键生物学过程;DNA修复;细胞凋亡;入侵和转移;血管生成和淋巴管生成、细胞信号和交互网络;免疫反应。新兴技术(基因组学、蛋白质组学、功能基因组学、代谢组学、组织阵列、成像)和模型系统。生物标志物:诊断、预后、分层及疗效。**遗传学、表观遗传学和基因组不稳定性。**小残留病变,*前病变。**微环境。分子病理学。**免疫学。转化研究。*****(目标发现、药物设计、免疫***、联合***、耐药性和个体化***)。化疗,放疗和手术。临床药理学。临床试验,将基础科学融入**临床试验。分子流行病学。 云生物抽提的外泌体可进行粒径检测。天津提取试剂盒外泌体售后分析
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血清样品(有条件的话尽量采用血浆,避免血小板来源的外泌体影响):
(1) 用**针和普通血清管(不含任何试剂,10ml规格)**10 ml;
(2) 室温静置 30 min,然后4°C条件下,静置3-4小时(此时可见血块析出);
(3) 用移液器吸取上面的淡黄色血清(应该有4 ml左右)转入15 ml离心管中,4°C条件下 3000g离心15min,小心取上清转入新的15 ml离心管中,**程度保证血清质量;
(4) 离心后的血清15分钟内冻存于-80°C冰箱;
提示:送样量**4 ml以上(分离4 ml血清约需要10-15ml全血)。
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