作者就在miR-19a安装了一个“监视器”,然后转染到星形胶质细胞内,再与**细胞,CAF共培养,在光镜和荧光图像下追踪到,miR-19a转移到了**细胞内,且在******显微镜下观察到了星形胶质细胞培养基有较多的外泌体(相较于CAF)。并一再证明是外泌体将miR-19a运载到**细胞:体外干扰外泌体;体内干扰外泌体;干扰外泌体后再加入外泌体。得出第三个结论:星形胶质细胞分泌的外泌体,将靶向PTEN的miR-19a转运到**细胞。 云生物主营产品很多,包括外泌体抽提和测序。四川WB外泌体报价
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外泌体样本准备——血浆样品(不能用肝素抗凝):(1) 用**针和EDTA抗凝管抽取全血,轻柔上下颠倒混匀后室温或者4°C保存,并在1小时内进行下一步处理;
(2) 4°C条件下,使用吊桶式转头1900 g离心10 min,小心吸取上清即为血浆,***500 μl左右丢弃。得到的血浆再次离心,条件为4°C,3000 g,15 min,小心吸出血浆,注意不要碰到底部和侧面的沉淀物;
(3) 将血浆冻存于-80°C;干冰运输。
提示:送样量**4 ml以上(分离4 ml血浆约需要8-10 ml全血)。
体液样本收集外泌体,乳汁。1、样本采集:
1).采集方式:不同的方式(手动或电刺激)收集的乳汁会影响其脂肪的含量,皮肤对样本的污染程度也不同。
2). 采集部位:乳房的前后部产生的乳汁成分有一定差异,一般采集相同体积后混合,或者从全乳收集。
3). 样本保存:低温保存。不可冰冻或常温、高温保存。不同的保存容器(玻璃、聚乙烯、聚丙烯等)会通过影响细胞含量而影响外泌体的含量。
2、注意事项
要注意选择对照组,因为有很多因素可以影响乳汁中外泌体的成分,其中包括泌乳阶段、乳汁产量、婴儿哺乳、饮食、代谢状态、生理与心理状态等。例如初乳(1-5天)、过渡乳(6-15天)和成熟乳中蛋白质、脂肪、维生素和抗体的浓度相差很大。 云生物专业致力于外泌体服务。
2019**火的7大热点方向,纵观2019年的国自然评审结果,非编码 RNA、m6A、外泌体、**免疫、细胞自噬、肠道菌群、干细胞等大方向属于科研热点。外泌体在生物学过程中扮演着重要角色,以及它作为疾病诊断与***的特殊功能。其在基金中一般存在有两种作用途径,一种是作为靶向***病灶的载体,一种是促进疾病进程的因素来研究。外泌体与miRNA的热点交互这两年也一直中标数相当可观,2019年外泌体相关项目多达519项,高于2018年的420项,热度稳中有升。
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**多组学研究:与中山大学附属***医院研究团队合作,在难以获得复发转移肝*组织样本的前提下,根据现有文献进行算法还原、建模及数据库挖掘,获取公共数据库中已有肝*样本(尤其是复发转移)RNA-seq、单细胞测序和部分蛋白组学数据,重新进行分析,几乎是零基础进行;协助其构建了相对完善的组学分析体系,并寻找到多个与复发转移相关的靶点,同时构建了新的临床预测模型。**科研基金:检测服务及数据分析助力取得2020年国自然面上十项、青年基金十八项。四川WB外泌体报价