磁珠法核酸提取仪的基本原理:抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:1) 裂解:在样品中加入裂解液,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,细胞裂解,释放核酸。2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。核酸提取纯化原则和要求:尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质。深圳核酸提取厂家
全自动核酸提取工作原理:样本裂解是核酸提取过程中很关键的一步,只有充分裂解了细胞或病原体,才能释放里面的核酸。病原体样本类型复杂多样,不同样本裂解的难易程度也有差异,样本裂解是否充分直接关系到后续的核酸得率。提高裂解效率可从裂解液成分、裂解温度和时间去考虑。裂解液成分:对于一些难裂解的样本,可以通过提高胍盐浓度以及表面活性剂浓度来增强裂解液的裂解能力。胍盐和表面活性剂可以促使蛋白变性,破坏细胞膜,使核酸和蛋白解离,从而释放更多的核酸。裂解温度和时间:提高温度和增加裂解时间可以让细胞裂解更彻底,得到更多核酸,需要摸索合适的温度和时间;温度过高或时间过长,也有可能导致核酸断裂或醇类挥发导致的提取效率下降。南京全血核算提取试剂盒销售公司磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。
磁棒法核酸提取仪:通量通常有8、16、32、96通道,磁棒只带走磁珠,转移到下一个步骤相应的反应孔中,另外选择磁棒法的提取仪器较好要功能更齐全的,比如可以加热,每个加热槽较好单独温控,这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度,另外很重要的一点是,带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗彻底。磁棒法核酸提取仪混匀方式1)震荡混匀:通过磁棒的上下震动混匀磁珠和核酸,为市面上主流方法2)旋转混匀:通过磁棒的旋转混匀磁珠和核酸,相比传统的振荡式混匀技术,气溶胶的产生量大幅降低50%以上。交叉污染而导致的假阳性风险被更有效控制,进一步保障实验结果的准确性。另外,旋转的混匀方式较大限度的保留了DNA的长链,减少核酸机械的断裂,提高后续检测的灵敏度。
什么是核酸:由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的好基本物质之一。核酸较广存在于所有动植物细胞、微生物内、生物体内的核酸常与蛋白质结合形成白。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA)。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。提取核酸的方法及其优缺点:1.保证核酸一级结构的完整性。2.排除其它分子的污染。核酸提取应注意的问题:1.简化步骤,缩短提取时间2.减少化学因素对核酸的降解3.减少物理因素对核酸的降解:机械剪切力和高温4.防止核酸的生物降解。核酸提取破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质。
基本原理:全自动核酸提取系统是一类应用配套的核酸提取试剂来自动化完成样本核酸快速提取过程的仪器。根据其提取方法的不同,可分为离心柱法核酸提取仪和磁珠法核酸提取仪。 离心柱法全自动核酸提取系统主要将离心机(负压装置)、自动移液装置和自动抓取器等功能组件集成于一体。其实现原理是:让核酸吸附到离心柱硅胶膜上,经过洗涤液去除杂质后,再从硅胶模上洗脱核酸。磁珠法核酸提取系统是将吸附在磁珠上的核酸,通过磁分离装置提取出来。根据分离装置的不同,可进一步分为移液式和磁棒式。移液式是通过自动移液装置完成加液裂解、样品混匀、洗涤洗脱、废液移除等步骤,吸附有核酸的磁珠被磁分离装置固定在样品管内,从而实现核酸分离。由于在移除液体时难免残留洗涤液,其中的盐和乙醇可能会影响后续洗脱效率和PCR反应体系。核酸提取在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分。自动核算提取设备销售公司
核酸提取仪需要注意的事项:操作人员不得擅自拆解仪器。深圳核酸提取厂家
磁珠结合效率决定了有多少核酸可以吸附到磁珠上,即洗脱核酸的上限。影响结合效率的因素有磁珠的吸附能力以及结合缓冲液的结合能力。磁珠吸附能力:磁珠提取系列磁珠一般是硅羟基磁珠,磁珠吸附能力受到磁珠比表面积以及修饰基团的密度影响。一般选择修饰基团多,比表面积大的磁珠,一般磁珠粒径越小,比表面积越大。但也不是磁珠粒径越小越好,磁珠粒径小,吸附速度也会变慢,可根据实际样本情况自行选择。结合缓冲液一般用异丙醇或乙醇结合。通常可以通过提高醇的比例来增强结合能力,同时也要提高离液盐的浓度来促进核酸与磁珠的结合。深圳核酸提取厂家