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    焦磷酸测序(Pyrosequencing)随着技术的不断改进，现在认为焦磷酸测序技术（Pyrosequencing）是甲基化检测新的金标准。焦磷酸测序作为一种新的序列分析技术，能够快速地检测甲基化的频率，对样品中的甲基化位点进行定性及定量检测，为甲基化研究提供了新的途径。在序列延伸过程中，根据C和T的掺入量来定量确定单个位点的C-T比例。因此，不同位点的甲基化变异就能被准确检测，并给出精确的甲基化程度的数据。QIAGEN公司在焦磷酸测序的应用上具有明显的优势，目前提供三种焦磷酸测序仪器，通量由低到高，适合不同的应用。PyroMarkQ24的强项在于可对多达24个样品进行焦磷酸测序。需要大样品量的应用更适合在PyroMarkQ96ID上进行。在考虑到处理成百上千个样品所需的大量试剂时，运行通量**化可能会使实验成本变得很高。而PyroMarkQ96MD装有一台高度灵敏的光检测摄像头，可以在减少试剂量的情况下对少量的DNA模板进行准确测序。这些不同平台的推出，对于我们实际研究提供了更有效的检测手段。 芯片平台作为目前比较成熟的筛选工具。山东WGBS技术服务

Chip-Seq 是指通过染色质免疫共沉淀技术（ChIP）特异性地富集目的蛋白结合的DN**段，并对其进行纯化和文库构建；然后对富集得到的DN**段进行高通量测序，通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上，从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的 DNA 区段信息，是目前在全基因组水平研究蛋白结合靶DNA序列的重要手段，为转录因子、组蛋白修饰、核小体定位等表观遗传学的研究提供有效方法。

应用领域

1、确定组蛋白修饰的位置及其与基因表达的关系。

2、完成对转录因子及其它蛋白在基因组上结合位点的精细定位。

3、研究特定的核小体或组蛋白的分布。 上海单细胞测序技术服务售后服务筛选耐药的相关biomaker及表观调控机制。

GOS2基因靶向甲基化测序确定了一种快速复发、常规致死的肾上腺皮质*亚型

Targeted Assessment of G0S2

Methylation Identifies a Rapidly Recurrent, Routinely Fatal Molecular Subtype

of Adrenocortical Carcinoma. Clin Cancer Res. 2019; 25(11):3276-3288.

(IF= 10.199)

研究者分析了ACC-TCGA数据，在114例肾上腺皮质**的**队列中鉴定了一个在CIMP高ACC中***被高甲基化并沉默的基因G0S2，并通过高通量BSP得到验证。G0S2基因CpG岛高甲基化**预测不良临床后果，是ACC快速复发或致死的标志。评估G0S2甲基化对临床决策是直接可行的，并有助于对侵袭性ACC进行有效辅助***。

industryTemplate5hmc是发现的一种修饰碱基，成为哺乳动物的“第六碱基”。

Hepatic

stellate cell transdifferentiation involves genome-wide remodeling of the DNA

methylation landscape. J Hepatol. 2016;64(3):661-73. (IF= 14.911)

肝星状细胞(HSC)是导致肝纤维化发生和进展的关键细胞类型。DNA羟甲基化与转录***有关，其模式在人类疾病中经常发生改变。研究者采用简化基因组氧化-亚硫酸盐测序(RRBS/oxRRBS)检测静止和******状态的大鼠HSC细胞的5mC和5hmC水平，证实了5mC和5hmC在肝纤维化和HSC转分化过程中的整体变化，表明DNA甲基化/羟甲基化是HSC***的关键步骤，可能会为支持纤维生成的分子事件带来新的见解，并可能为疾病进展提供生物标志物以及潜在的新药物靶点。 WGBS用于人、哺乳动物及农林牧渔方向的高水平甲基化研究。重庆6mA技术服务共同合作

CpG岛常位于基因转录调控区附近。山东WGBS技术服务

    cfDNABS-Seq送样要求一、送样类型分离好的血浆二、保存方式分离后的血浆，用ml离心管分装，例如：1ml/管；放-20℃冰箱中保存（短暂保存，1-2周）；放-80℃冰箱中长期保存(1年以内)；保存期间不能冻融。三、运输条件干冰运输：顺丰陆运（3-4天时间），夏季10-15公斤干冰；秋冬季10公斤干冰四、抽血要求1、使用Streck**管（不建议使用普通的EDTA-钠抗凝管），采集10ml外周静脉血（客户没有Streck**管，公司配送）；2、室温或者放置4℃冰箱中半小时以上，不超过8小时，进行血浆分离步骤五、血浆分离步骤1、4℃条件下以1600g离心10min，离心后将上清（血浆）分装到2、4℃条件下以16000g离心10min去除残余细胞，将上清移入新的离心管中，每管分装1ml;3、血浆样本存放于-80℃冰箱中保存;使用干冰运输,提取之前不能冻融。备注1：血浆分离在4℃条件进行，如果客户没有冷冻离心机，也可以在室温条件下进行；备注2：离心后取血浆上清，避免吸取白细胞；通常10ml全血可以获得4-5ml血浆。 山东WGBS技术服务