⊙外泌体发挥功能并一定需要受体细胞摄入外泌体:外泌体的膜蛋白有可能与细胞膜蛋白作用,***细胞内通路
⊙外泌体的角色之一:细胞-细胞通讯,比如抗原递呈
⊙外泌体的角色之二:垃圾箱,外排多余或者无功能的细胞成分
为什么要研究外泌体?:
⊙揭示疾病发病机制:从微环境角度揭示细胞之间通讯促进疾病发生的原因。
⊙寻找疾病诊断和预后的分子标志物
⊙外泌体作为药物载体,实现靶向给药
外泌体的分离和鉴定方法:
⊙外泌体的分离:差速离心、密度梯度离心、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法
⊙外泌体分离后需要进行粒径分析:如NanoSight NS300
⊙外泌体检测的marker:常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70
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样本准备注意事项:●采集的样本需要符合纳入标准:如年龄、肥胖(身高、体重)、血糖血脂血压、诊断情况等。●统一早晨空腹**,尽量避免样本间的差异影响。●如个别样本发生溶血,则弃掉。●样本编号用油性笔清楚地写在管壁及管盖上。●离心管在放入冰箱前,用封口膜密封。●如果提供的是冻存细胞株,需提供详尽的复苏方法。●细胞培养基必须使用去除exosome(de-exosome)的血清或者无血清培养基(例如ThermoFisher的SFM)。●分离外泌体前的样品不能加入任何RNA保护剂(如Trizol)。●分离好的外泌体如需进行电镜观察,需要放4°C保存,并且不宜保存太久。●全血建议使用PAXgene管保存,不可冻融,取血后尽早制备血浆或血清,血浆或血清可以-80°C保存,但应避免反复冻融。●储存条件以及储存时间影响外泌体得率,保存在-80℃冰箱中的样本,如果储存时间过长,外泌体产量也会***降低。●干冰运输应采用壁厚且质量完好的泡沫箱,24小时到达的,干冰数量不得低于5公斤;48小时到达的,干冰数量不得低于8公斤;夏季适当增加干冰(倍)。 江苏数据库外泌体售后分析外泌体抽提是什么试剂盒?
**外泌体作用机制研究进展- **免疫中外泌体的多重角色
- 外泌体MiRNA依赖的**转移级联
- *细胞外泌体PD-L1干扰免疫
- 外泌体改造**微环境
- 外泌体调节**免疫信号轴
- **耐药性的外泌体传达外泌体分离提纯与检测技术进展- 高精度外泌体分离控制
- 通用的外泌体提取方法
- 外泌体多维标记追踪
- 外泌体新型成像与检测
- 基于微流控技术的外泌体分离分析
- 临床级外泌体生产关键要素外泌体生物学事件研究进展- 外泌体内容物多样性与整体效应
- 外泌体MiRNA, LncRNA, mRNA, CircRNA作用
- 外泌体成分与亲本细胞关系
- 外泌体MiRNA介导细胞间应答
- 外泌体驯化免疫细胞
- 外泌体远程信号递送方式外泌体的临床开发应用- **细胞外泌体PD-L1开发策略
- **免疫***的外泌体途径
- 外泌体MiRNA的临床诊断价值
- 外泌体的靶向修饰
- RNA药物的外泌体载体改装
- 外泌体标志物多中心临床试验
Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:4.那么找到了PTEN是星形胶质细胞外泌体中的miR-19a沉默掉的,那么PTEN沉默了之后,**细胞后续发生了什么变化促进了转移灶形成呢?作者用多西环素处理**细胞,要么丢失PTEN,要么出现红色荧光蛋白,发现红色圈圈内的细胞因子CCL2表达差异,接着就抓住这点差异进行研究。**终证明了星形胶质细胞分泌的外泌体,将miRNA转运到原来PTEN正常的**细胞,使PTEN丢失,接着促进**细胞分泌CCL2,招募IBA1+骨髓细胞,促进**细胞扩增,减少凋亡,促进**转移灶形成。联想:**细胞在miRNA调控下,沉默抑*基因促进转移,那么其他**转移到一些脏器是否也存在类似的,增加miRNA沉默抑*基因或是减少miRNA****基因的促进转移呢?。 胆汁抽提外泌体需要提供多少量?
**多组学研究:与中山大学附属***医院研究团队合作,在难以获得复发转移肝*组织样本的前提下,根据现有文献进行算法还原、建模及数据库挖掘,获取公共数据库中已有肝*样本(尤其是复发转移)RNA-seq、单细胞测序和部分蛋白组学数据,重新进行分析,几乎是零基础进行;协助其构建了相对完善的组学分析体系,并寻找到多个与复发转移相关的靶点,同时构建了新的临床预测模型。**科研基金:检测服务及数据分析助力取得2020年国自然面上十项、青年基金十八项。云生物抽提的外泌体质量上乘。江苏数据库外泌体售后分析
关于外泌体的文献有哪些?江苏数据库外泌体售后分析
有些研究证明外泌体miRNA的表达水平在不同生理条件下是会变化的。在健康人血清外泌体中,miR-21的水平比那些恶性胶质瘤患者更低。在非小细胞肺*患者血浆囊泡中,let-7f,miR-20b和miR-30e-3p的水平比正常对照组更低。在良性**和卵巢*中,发现了八种外泌体miRNA的表达水平不同,包括miR-21和miR141。以上研究都表明外泌体的来源细胞有一种分拣机制来指导特异性的miRNA进入外泌体。根据前人的研究,存在一种类型的miRNA,它们更偏好于被装入外泌体,如miR-320和miR-150。miR-320家族***分布于正常组织和**分泌的外泌体中。miR-150在HEK293T细胞株、**患者的外周血、集落刺激因子-1诱导的骨髓来源的巨噬细胞和结肠*患者血清中的外泌体中都有高表达。而且,一些miRNA,如miR-451,在正常细胞来源的外泌体中高表达,如HMC-1细胞株、HEK293T细胞株和初级T淋巴细胞。还有一些miRNA,如miR-214和miR-155,在**细胞株来源的和**患者外周血的外泌体中含量丰富。 江苏数据库外泌体售后分析