采样步骤
1. 建议取样,植物绿色组织部分(叶片等)。
2. 取样前建议光照6h 以上,使样本中合成大量叶绿体,再进行取样。建议5g 以上绿色组织样本(叶片等),可多采集一些留做备份样本。
3. 取样后,样本用锡箔纸包裹(或冻存管盛放),迅速过液氮速冻,转移至-80℃冰箱内冻存。
4. 干冰运输。干冰用量建议以3kg/day 计算。一般建议10kg 起。
植物线粒体样本采集操作指南:
采样步骤
1. 建议取样:推荐植物愈伤组织
无法培养愈伤组织的,可采用白化苗(叶绿体含量极低的组织)
2. 愈伤组织取样5g 以上样本;
3. 无法培养愈伤组织的植株,可进行暗培养,建议取样前植株避光培养一周,获得白化苗,取白化苗组织5g 以上(叶片等),可多采集一些留做备份样本。
4. 取样后,样本用锡箔纸包裹(或冻存管盛放),迅速过液氮速冻,转移至-80℃冰箱内冻存。
5. 干冰运输。干冰用量建议以3kg/day 计算。一般建议10kg 起。
小基因组测序服务推荐云生物。陕西植物叶绿体基因组小基因组测序服务
eggNOG全称为evolutionarygenealogyofgenes:Non-supervisedOrthologousGroups,是一个蛋白聚类数据库,带有功能描述和功能类别说明,由EMBL(欧洲分子生物实验室)维护。包含1,133个物种、共721,801个直系同源组、共41个不同水平的直系同源组分类,整合了5,214,234个蛋白序列。分别更新了4,873个COG数据库信息和4,850个KOG数据库信息。GO全称为GeneOntology,一套国际标准化的基因功能描述的分类系统。GO其分为三大类:1)细胞组分(CellularComponent):用于描述亚细胞结构、位置和大分子复合物,如核仁、端粒和识别起始的复合物等;2)分子功能(MolecularFunction):用于描述基因、基因产物个体的功能,如与碳水化合物结合或ATP水解酶活性等;3)生物过程(BiologicalProcess):用来描述基因编码的产物所参与的生物过程,如有丝分裂或嘌呤代谢等。Swiss-Prot,是2002年由UniProtconsortium建立的基因数据库,其特点在注释结果经过实验验证,可靠性较高,可用作其他数据的参考。 北京小基因组完成图小基因组测序活动云生物小基因组测序拥有完善的售后。
基因功能注释:基因预测得到样品的氨基酸序列后,与已知的蛋白数据库进行比对,把样品的基因和其相对应的功能注释信息结合起来,得到注释结果。由于每一条序列比对结果可能超过一条,为保证其生物意义,注释时保留一条比较好比对结果作为该基因的注释。样品氨基酸序列与NR、Swiss-Prot、eggNOG、KEGG、GO数据库进行比对得到编码基因的功能注释信息。NR全称为Non-RedundantProteinDatabase,是一个非冗余的蛋白质数据库,由NCBI创建并维护,其特点在于内容比较***,同时注释结果中会包含有物种信息,可作物种分类用。但数据库中很多数据未经过验证,可靠性有待提高。数据库特点是数据很全,但是并不是全部的功能描述都特别准。
非编码RNA分析:非编码RNA(ncRNA)执行多种生物学功能的RNA分子,其本身并不携带翻译为蛋白质的信息,直接在RNA水平对生命活动发挥作用。相比于“垃圾RNA”的旧观念,人们开始认识到生物体内富含的这类RNA的无穷潜力。研究非编码RNA不仅为了解生物体的基因表达调控系统和生长提供了重要信息。对于叶绿体而言,非编码RNA的主要类型包括rrn5,rrn4.5,rrn16,rrn23;植物线粒体的非编码RNA类型包括rrn5,rrn18,rrn26;***和动物线粒体的非编码RNA类型包括rrnS,rrnL。云生物小基因组测序可进行测序组装。
线粒体、叶绿体的内膜和外膜存在明显的性质和成分差异。外膜与真核细胞 的内膜系统具有性质上的相似,可与内质网和高尔基体膜融合沟通;而它们的内膜则与细菌质膜相似,内陷折叠形成细菌的间体、线粒体的蜡和叶绿体的类囊体。在膜的化学成分上,线粒体和 叶绿体内膜的蛋白质与脂质的比值远大于外膜,接近于细菌质膜的成分。这些特性都暗示线粒体和叶绿体的内膜起源于**初的共生体(呼吸细菌和蓝细菌)的质膜,而外膜则来源于它们的宿主 (共生体进入宿主细胞时包被形成)。采用二代Illumina Hiseq结合三代PacBio测序技术对样本DNA进行基因组测序。贵州小基因组完成图小基因组测序售后分析
小基因组测序的好处您了解吗?陕西植物叶绿体基因组小基因组测序服务
标准分析:1.测序数据概况
(1) 原始测序数据说明
(2) 测序数据质控及统计
(3) 三代测序数据统计
2.基因组组装
3. 基因组组分分析
(1) 编码基因分析
(2) ORFs扫描及跨膜结构预测
(3) 非编码RNA分析
4. 基因功能注释
基因组圈图
高级分析:
比较基因组分析
1.SNP检测与注释
2.Indel检测与注释
3.SV检测
4.基因组共线性分析
5.线粒体与叶绿体基因组片段交流分析
6.共有和特有基因分析
7.系统进化分析、选择压力分析
定制化生信分析
1.密码子偏好性分析
2.长重复序列Long repeat分析
3.简单重复序列SSR分析
4.基因表达量及表达差异分析(可由客户提供RNAseq) 陕西植物叶绿体基因组小基因组测序服务