**外泌体作用机制研究进展- **免疫中外泌体的多重角色
- 外泌体MiRNA依赖的**转移级联
- *细胞外泌体PD-L1干扰免疫
- 外泌体改造**微环境
- 外泌体调节**免疫信号轴
- **耐药性的外泌体传达外泌体分离提纯与检测技术进展- 高精度外泌体分离控制
- 通用的外泌体提取方法
- 外泌体多维标记追踪
- 外泌体新型成像与检测
- 基于微流控技术的外泌体分离分析
- 临床级外泌体生产关键要素外泌体生物学事件研究进展- 外泌体内容物多样性与整体效应
- 外泌体MiRNA, LncRNA, mRNA, CircRNA作用
- 外泌体成分与亲本细胞关系
- 外泌体MiRNA介导细胞间应答
- 外泌体驯化免疫细胞
- 外泌体远程信号递送方式外泌体的临床开发应用- **细胞外泌体PD-L1开发策略
- **免疫***的外泌体途径
- 外泌体MiRNA的临床诊断价值
- 外泌体的靶向修饰
- RNA药物的外泌体载体改装
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细胞上清(需采用去除外泌体的培养基):
(1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,贴壁细胞密度在70 %-80 %,悬浮细胞密度在60 %-70 %;
(2) 对于贴壁细胞,去除原有培养基,换为新的不含外泌体的培养基或者无血清培养基;对于悬浮细胞,300 g,4°C,10 min收集细胞;
(3) 使用不含外泌体的培养基或者无血清培养基悬浮细胞并继续培养。细胞继续培养24-48 小时,根据细胞的生长速度确定收取上清时间;
(4) 收集细胞上清,300 g,4°C,离心10 min;小心吸取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片;
(5) 3000 g,4°C,再次离心15 min,确保将细胞或者细胞碎片去除干净;
(6) 取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片,合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌的玻璃瓶,可在4°C短期保存(1-2天),长期保存可冻存于-80°C 。建议细胞上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在4°C和-80°C,都会对产量有一定的影响。
四川鉴定外泌体售后服务血浆样品外泌体怎么制备?尿液:(1) 采集前/中后段晨尿,应该尽量选择受试者的“新鲜”尿液100ml,并注意避免细菌污染,收集前注意对饮食的控制,于4℃临时保存(不得超过8 h);
(2) 并于3000×g离心15min,去除细胞或细胞碎片;
(3) -80℃冰箱中保存。
脑脊液:
(1) 收集脑脊液10ml,采集方式为腰椎穿刺,样本一经分离,请务必立即置于冰上或4℃短暂保存(不得超过4 h),避免受到血液污染,勿使用含肝素抗凝剂的采样管收集盛放;
(2) 并于3000×g 离心15min,去除细胞或细胞碎片;
(3) -80℃冰箱中保存。
Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:1.作者是怎么发现脑转移的**细胞存在PTEN缺失的呢?又是怎么验证是依赖于脑的环境?其实这点大家都能想到要怎么做(嘿嘿只是没有去做做看,去发现些什么),作者正是把不同来源的**不同转移部位(脑,肺,骨)的基因表达做个热图,发现脑转移的**细胞的共同特点----PTEN丢失,并将原发灶与脑转移灶**细胞进行免疫组化染色,发现PTEN表达正常的原发灶**细胞,转移到脑后PTEN丢失。更有趣的是作者发现,把脑转移的**细胞分离出来培养,PTEN表达回复了;紧接着,作者把这种分离出来的**细胞培养一代后,重新种植到小鼠的脑内和皮下成瘤,发现脑内的PTEN表达又丢失了。得出了***个结论:脑转移灶的可回复性PTEN丢失依赖于脑微环境。 外泌体RNA质检内容包括哪些?
Nature:从血液通过exosomes入手早期确诊**。原文标题:Glypican-1identifiescancerexosomesanddetectsearlypancreaticcancer。原文摘要:Exosomes are lipid-bilayer-enclosed extracellular vesicles that contain proteins and nucleic acids. They are secreted by all cells and circulate in the blood. Specific detection and isolation of cancer-cell-derived exosomes in the circulation is currently lacking. Using mass spectrometry analyses, we identify a cell surface proteoglycan, glypican-1 (GPC1), specifically enriched on cancer-cell-derived exosomes. GPC1+ circulating exosomes (crExos) were monitored and isolated using flow cytometry from the serum of patients and mice with cancer. GPC1+ crExos were detected in the serum of patients with pancreatic cancer with absolute specificity and sensitivity, distinguishing healthy subjects and patients with a benign pancreatic disease from patients with early- and late-stage pancreatic cancer. Levels of GPC1+ crExos correlate with tumour burden and the survival of pre- and post-surgical patients. 云生物有专业做外泌体抽提和服务的团队。四川鉴定外泌体售后服务
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