ssGSEA(single sample GSEA)主要针对单样本无法做GSEA而提出的一种实现方法,原理上与GSEA是类似的。ssGSEA根据表达谱文件计算每个基因的rank值,再进行后续的统计分析。通过这个方法,我们可以得到每个样本的免疫细胞或者免疫功能,免疫通路的活性,然后根据免疫活性进行分组。
ssGSEA量化免疫细胞浸润**的一个优点就是自己可以定制量化免疫浸润细胞种类。目前公认并且用的**多的免疫细胞marker就是2013年发表在Immunity上的SpatiotemporalDynamicsof IntratumoralImmuneCellsReveal the Immune Landscape in Human Cancer 所提供的免疫细胞marker genes(Table S1),能提取到24种免疫细胞信息。 生物医学科研领域的组学数据处理。广东临床统计数据科学经验丰富
三角坐标统计图是采用数字坐标形式来表现三项要素的数字信息图像。三角形坐标图常用百分数(%)来表示某项要素与整体的结构比例。三条边分别表示三个不同分量,三个顶点可以看作是三个原点。三角图可以展示某特定值在一个整体中不同类型的分布。在生物信息中三角图可以方便地展示3种不同疾病或者3个不同分组之间某个指标的相关性。
数据要求
多个样本的三个变量值,或者多个基因在三个不同分组中的数据值,可以是突变频率数据、基因表达数据、甲基化数据等。 重庆组学实验数据科学活动自有服务器机房,可随时调用各计算平台算力,且团队成员有多年科研经历。
术语解读:中位数Q2:二分之一分位数上四分位数Q1:序列由小到大排序后第(n+1)/4所在位置的数值下四分位数Q3:序列由小到大排序后第3(n+1)/4所在位置的数值**值:非异常范围内的**值,四分位距IQR=Q3-Q1,上限=Q3+最小值:非异常范围内的最小值,下限=数据要求:某一基因在各**及对应的正常组织的表达数据。应用示例1:(于2014年2月发表于Nature.,影响因子)文章研究了12种主要**类型的突变景观和意义,它首先使用小提琴图展示了12种**的突变频率分布情况,然后查找确定具有***意义的突变基因。应用示例2:(于2017年1月发表在NatCommun.,影响因子)文章研究了Pancancer建模预测体细胞突变对转录程序背景的特异性影响。研究人员基于开发的模型预测重要转录因子,然后使用预测出的突变转录因子的活性情况绘制泛*图谱。
GSEA数据要求1、通常为表达谱芯片或测序数据(已经过预处理),也可以是其他形式可排序的基因数据。2、具有已知生物学意义(GO、Pathway、**特征基因集等)的基因集。下游分析:得到GSEA结果之后的分析有:1.基因注释:1、绘制基因集富集趋势图(Enrichmentplot)横坐标:按差异表达差异排序的基因序列。数值越小(偏向左端)的基因**在shICAM-1组中有越高倍数的差异表达,数值越小(偏向右端)的基因在对照组中有越高倍数的差异表达。纵坐标:上方的纵坐标为富集打分ES,ES是一个动态的值,沿着基因序列,找到条目中的基因则增加评分,否则减少评分。通常用偏离0**远的值作为**终富集打分。下方的纵坐标**基因表达与表型的关联,***值越大**关联越强,数值大于0**正相关,小于0则**负相关。 云生物数据分析需要多久?
ssGSEA基本原理
对于一个基因表达矩阵,ssGSEA首先对样本的所有基因的表达水平进行排序获得其在所有基因中的秩次rank。然后对于输入的基因集,从基因集中寻找表达数据里存在的基因并计数,并将这些基因的表达水平求和。接着基于上述求值,计算通路中每个基因的富集分数,并进一步打乱基因顺序重新计算富集分数,重复一千次,***根据基因富集分数的分布计算p值整合基因集**终富集分数。
数据要求
1、特定感兴趣的基因集(通常为免疫细胞表面marker genes),列出基因集中基因
2、基因表达矩阵,为经过log2标准化的芯片数据或者RNA-seq count数数据(基因名形式与基因集对应)
下游分析
免疫细胞浸润分数相关性(corralation)分析 OmicCircos图可以对感兴趣的多个基因,展示其染色体的位置、拷贝数变异等多个特征。算法还原与开发数据科学欢迎咨询
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GeneInteraction基因互作:基因相互作用指miRNA、lncRNA、circRNA或其它RNA介导DNA转录,从而影响mRNA的表达过程。通俗意义上来说,基因互作关系指基于序列预测的靶基因对。miRNA通过与靶mRNA的结合,或促使mRNA降解,或阻碍其翻译,从而***目的基因的表达。竞争性内源RNA网络是靶基因预测的研究深入,简称ceRNA网络。通过进行ceRNA网络的分析,我们能从一个更为宏观的角度来解释转录体如何构建基因表达调控网络,从而进一步挖掘基因在其中的调控机制。基本原理:miRNA主要通过与靶基因的非翻译区(UTR)结合而发挥其作用,对miRNA和mRNA、lncRNA、circRNA结合进行的预测称为靶基因预测。靶基因预测使用软件根据miRNA和靶基因间的结合的规律预测结合基因对。在生物体内,miRNA可以通过与proteincoding特异性结合,影响相关基因的表达,从而参与调控细胞内的各项功能。ceRNA具有miRNA结合位点,能后竞争性地结合miRNA,***miRNA对靶基因的调控。例如lncRNA与miRNA竞争性结合,影响miRNA调控mRNA的过程,**终导致的mRNA表达失调。我们使用基于序列预测的软件对差异分析得到的miRNA与mRNA,lncRNA,circRNA进行靶点预测和ceRNA网络分析。 广东临床统计数据科学经验丰富