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体液样本收集外泌体，唾液需要注意的事项：

1）、包括采样部位；到目前为止，大部分的唾液EVs分析，其样本来自整个唾液，然而，不同腺体分泌的EVs量和成分肯定不一样，所以需要对样本采集标准化，根据不同的研究需要，选取不同的部位来收集唾液。

2）、采样时间；众所周知，唾液分泌有明显的昼夜差异，同时，饮食、吸烟，运动等也很大影响唾液的成分。所以采集的时间也需要标准化。

3）、对受试者的了解；至少1小时内没有刷牙、近几天没有做过口腔护理。其他口腔疾病需要考虑。

4）、采集技术：分为刺激（主动）取样和无刺激（被动）取样。 脑脊液抽提外泌体需要提供多少量？江苏测序外泌体销售

    外泌体（Exosome）是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构，密度，内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质。包括**细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，***又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等，而不同组织来源的外泌体在内容物组成和功能方面存在差异，同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。越来越多的证据表明，宿主细胞或**细胞分泌的外泌体参与了**发生、生长、侵袭和转移。对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。 北京粒径外泌体售后分析云生物抽提的外泌体质量很好。

1、样本采集：

1）.采集方式：不同的方式（手动或电刺激）收集的乳汁会影响其脂肪的含量，皮肤对样本的污染程度也不同。

2). 采集部位：乳房的前后部产生的乳汁成分有一定差异，一般采集相同体积后混合，或者从全乳收集。

3). 样本保存：低温保存。不可冰冻或常温、高温保存。不同的保存容器（玻璃、聚乙烯、聚丙烯等）会通过影响细胞含量而影响外泌体的含量。

2、注意事项

要注意选择对照组，因为有很多因素可以影响乳汁中外泌体的成分，其中包括泌乳阶段、乳汁产量、婴儿哺乳、饮食、代谢状态、生理与心理状态等。例如初乳（1-5天）、过渡乳（6-15天）和成熟乳中蛋白质、脂肪、维生素和抗体的浓度相差很大。

   作者就在miR-19a安装了一个“监视器”，然后转染到星形胶质细胞内，再与**细胞，CAF共培养，在光镜和荧光图像下追踪到，miR-19a转移到了**细胞内，且在******显微镜下观察到了星形胶质细胞培养基有较多的外泌体（相较于CAF)。并一再证明是外泌体将miR-19a运载到**细胞：体外干扰外泌体；体内干扰外泌体；干扰外泌体后再加入外泌体。得出第三个结论：星形胶质细胞分泌的外泌体，将靶向PTEN的miR-19a转运到**细胞。 您知道云生物的外泌体系列都有哪些吗？

    基于目前的研究，miRNA分拣如外泌体有四条可能的途径，虽然深层的机制还远不够清楚。一、中性鞘磷脂酶-2(nSMase2)依赖性途径。nSMase2是***个被报道与miRNA进入外泌体有关的分子。Kosakaetal.发现nSMase2的过表达能增加外泌体miRNA的数量，相反地，***nSMase2表达减少外泌体miRNA数量。二、miRNA模体和苏素化核不均一核糖**白（hnRNPs）依赖性途径。Villarroya-Beltrietal.发现苏素化的hnRNPA2B1能识别miRNA序列上的3’端部分，引起特异性的miRNA被装入外泌体。类似的是，其他两种hnRNP家族蛋白,hnRNPA1和hnRNPC,也能与外泌体miRNA结合，提示它们也可能是miRNA分拣机制中的一员。然而，结合的模体还未明确。三、miRNA序列3’末端依赖性途径。Koppers-Lalicetal.发现尿苷化的内源性miRNA的3’末端主要存在于来自B细胞或尿液的外泌体中，而腺苷化的内源性miRNA的3’末端主要存在于B细胞中。以上两种选择模式共同提示了miRNA序列3’末端含有一个关键的分拣信号。四、miRNA诱导的沉默复合体(miRISC)相关途径。 云生物有专业做外泌体抽提和服务的团队。北京WB外泌体服务

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    Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路：4.那么找到了PTEN是星形胶质细胞外泌体中的miR-19a沉默掉的，那么PTEN沉默了之后，**细胞后续发生了什么变化促进了转移灶形成呢？作者用多西环素处理**细胞，要么丢失PTEN,要么出现红色荧光蛋白，发现红色圈圈内的细胞因子CCL2表达差异，接着就抓住这点差异进行研究。**终证明了星形胶质细胞分泌的外泌体，将miRNA转运到原来PTEN正常的**细胞，使PTEN丢失，接着促进**细胞分泌CCL2，招募IBA1+骨髓细胞，促进**细胞扩增，减少凋亡，促进**转移灶形成。联想：**细胞在miRNA调控下，沉默抑*基因促进转移，那么其他**转移到一些脏器是否也存在类似的，增加miRNA沉默抑*基因或是减少miRNA****基因的促进转移呢？。 江苏测序外泌体销售