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    外泌体CD63&Tsg101检测试剂盒：外泌体CD63&TSG101蛋白检测试剂盒是针对外泌体标志蛋白CD63和TSG101检测而研发的一款高效且方便的试剂盒产品。该产品中包含外泌体蛋白**裂解液：其组分经过优化处理，可高效裂解外泌体；CD63&TSG101蛋白阳性对照品：由Hela细胞裂解后制备而成，可用于监测实验体系；CD63和TSG101抗体：该抗体经过严格筛选而得，适用于外泌体CD63和TSG101蛋白的检测。操作指南1、实验准备：实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上（如有沉淀析出，可37℃加热至溶解）；2、将外泌体样本与裂解液按体积比1:1添加混匀，置于冰上裂解10min；3、12000g离心5min，取上清，进行BCA蛋白浓度测定及WesternBlot等实验；4、进行SDS-PAGE实验时，取CD63&TSG101阳性对照品10μg与实验样品同时进行。 血浆样品抽提外泌体需要提供多少量？四川数据库外泌体服务

⊙外泌体的大小：外泌体的直径约40-150nm

⊙从研究上来讲并不太严格区分外泌体（exosomes）或微泡（microvesicles）

⊙外泌体属于胞外囊泡类，除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡

⊙外泌体的直接比微泡的要小，后者直径为100nm-1μm

⊙外泌体的数量：人体中大约有1014个，近乎于平均每个细胞产生1000-10000个

⊙外泌体的细胞源：人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体

⊙外泌体具有异质性，即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有很大功能区别

⊙外泌体的存在：外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中

⊙外泌体产生于细胞中的多泡体 山东提取试剂盒外泌体售后服务云生物的外泌体服务拥有完善的售后服务。

    Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路：1.作者是怎么发现脑转移的**细胞存在PTEN缺失的呢?又是怎么验证是依赖于脑的环境？其实这点大家都能想到要怎么做（嘿嘿只是没有去做做看，去发现些什么），作者正是把不同来源的**不同转移部位（脑，肺，骨）的基因表达做个热图，发现脑转移的**细胞的共同特点----PTEN丢失，并将原发灶与脑转移灶**细胞进行免疫组化染色，发现PTEN表达正常的原发灶**细胞，转移到脑后PTEN丢失。更有趣的是作者发现，把脑转移的**细胞分离出来培养，PTEN表达回复了；紧接着，作者把这种分离出来的**细胞培养一代后，重新种植到小鼠的脑内和皮下成瘤，发现脑内的PTEN表达又丢失了。得出了***个结论：脑转移灶的可回复性PTEN丢失依赖于脑微环境。

    Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路：2.那么到底是脑微环境中的哪种细胞，哪种物质介导，致使PTEN丢失呢？作者想想脑内的**细胞周围无非是：星形胶质细胞，**相关成纤维细胞(CAF)，正常成纤维细胞，就把这些细胞分别与**细胞共培养，发现只有与星形胶质细胞共培养后，PTEN的表达明显下降。接着作者就把星形胶质细胞给干扰掉，把星形胶质细胞内特异性靶向PTEN丢失的microRNA干掉，发现脑转移的**细胞内的PTEN没有丢失，瘤体也变小了。得出第二个结论：星形胶质细胞来源的miR-19a沉默了**细胞中的PTEN。 云生物专业致力于外泌体分离。

    体液样本收集外泌体。1、选择血清还是血浆？推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体，含量占血清中外泌体的50%以上，选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关，这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了***PCR，肝素可以与外泌体结合，阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物治疗的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的***并***其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应（尽管其程度小于肝素），但是还是优于其他选择。此外，有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生，因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之，目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放，作用和下游反应产生特异性影响。 细胞上清抽提外泌体需要提供多少量？浙江电镜外泌体服务

一个好的外泌体需要具备哪些特点您了解吗？四川数据库外泌体服务

    分离:超速离心法:超速离心法是外泌体分离**常见的技术之一。据不完全统计，约有1/2的研究者会选择该种方式分离外泌体。该方法由几个离心步骤组成，可分步去除细胞、细胞碎片和大囊泡，沉淀外泌体。但该种方法用于血浆和血清等粘性生物液体时效率较低，且重复离心操作有可能对外泌体造成损害，从而降低其质量。如将超速离心配合蔗糖溶液进行梯度密度离心可得到纯度更高的外泌体，是公认可以得到**高纯度的分离方法。但此法对离心时间非常敏感，一般需要8-30h，产率较低，同样不适用于血浆和血清等粘性生物液体中外泌体的分离，因此难以***普及。聚合物沉淀法:第二大主流的外泌体分离技术就是基于聚合物的沉淀法了，**常见的聚合物是聚乙二醇（PEG）。通常将含有聚合物的沉淀溶液与生物体液混合，4℃温育，低速离心，沉淀外泌体。目前已有成熟的PEG-base商业试剂盒，比如图中的ExoQuick™（SystemBiosciences）。这类试剂盒使用容易和快速，不需要额外的设备，且随着产品不断更新换代，提取效率和纯化效果逐渐提高，因而逐渐取代超速离心法并推广开来。沉淀法的主要缺点是分离物中会有少量的聚合物存在。不过大家不用担心，一般来说这些物质不会干扰下游分析。四川数据库外泌体服务