云南地理谱系遗传小基因组测序售后服务

在高等生物细胞内除了细胞核遗传外，细胞质遗传也是重要的研究方向。细胞质中主要的遗传物质的载体是线粒体和叶绿体。利用高通量测序技术对动植物线粒体基因组及植物叶绿体基因组进行测序组装，突破传统mt/cpDNA分离提纯的实验壁垒，可直接利用组织总DNA获得线粒体/叶绿体基因组，对序列信息进行深入解析，通过比较基因组分析获得物种分类、系统进化、地理谱系遗传等信息。云生物自主研发的Enrichment富集技术，可降低核DNA污染，将总DNA中靶细胞器基因组比例提升。专业生物信息团队，提供人工基因注释矫正，满足NCBI数据库上传要求，高质量结果交付，助力高水平研究。云生物提供IRs边界的收缩与扩张。云南地理谱系遗传小基因组测序售后服务

industryTemplate陕西叶绿体小基因组测序服务技术团队负责人均9年以上从业经验，项目经验丰富，提供可以个性化方案定制。

    InDel检测及注释：InDel是DNA序列的插入（Insertion）和缺失（Deletion）现象的总称，狭义的InDel表示1~10bp的短InDel。在基因组编码区域，InDel的发生可能会引起移码突变、氨基酸改变、假基因的出现等等现象。这里分析的是狭义的InDel。利用LASTZ软件将样品和参考序列进行比对，检测得到初步InDel结果。然后取参考序列InDel位点上下游150bp与样品的测序reads用BWA软件及SAMtools进行比对验证，过滤得到可靠的InDel。SV检测：基因组结构变异（SV，StructuralVariation）通常是指基因组内DN**段缺失、插入、重复、倒位、异位。使用MUMmer软件对目标基因组和参考基因组进行比对，再使用LASTZ对区域间进行比对，从区域比对结果中查找SV。

    使用IlluminaHiseq测序平台对样品进行测序，产生的原始数据（RawData）存在一定比例低质量数据，为了使得后续分析的结果更加准确可靠，会对原始的测序数据进行如下处理：1)去除reads中的adapter序列；2)剪切前去除5’端含有非AGCT的碱基；3)修剪测序质量较低的reads末端(测序质量值小于Q20)；4)去除含N的比例达到10%的reads；5)舍弃去adapter及质量修剪后长度小于50bp的小片段。PacBioSequel平台测序数据以bam格式保存，可以转化成fasta或fastq序列格式。PacBioSequel平台原始测序数据中存在接头序列、低质量序列、测序错误序列等，为了得到更精确的组装结果，需要对原始的测序数据进行如下处理：1.过滤掉长度小于100bp的Polymerasereads；2.过滤掉质量小于reads；3.从Polymerasereads中提取Subreads，过滤掉adapter序列；4.过滤掉长度小于500bp的Subreads。 动物线粒体取样要注意什么？

采样步骤

1. 建议取样，植物绿色组织部分（叶片等）。

2. 取样前建议光照6h 以上，使样本中合成大量叶绿体，再进行取样。建议5g 以上绿色组织样本（叶片等），可多采集一些留做备份样本。

3. 取样后，样本用锡箔纸包裹（或冻存管盛放），迅速过液氮速冻，转移至-80℃冰箱内冻存。

4. 干冰运输。干冰用量建议以3kg/day 计算。一般建议10kg 起。

植物线粒体样本采集操作指南：

采样步骤

1. 建议取样：推荐植物愈伤组织

无法培养愈伤组织的，可采用白化苗（叶绿体含量极低的组织）

2. 愈伤组织取样5g 以上样本；

3. 无法培养愈伤组织的植株，可进行暗培养，建议取样前植株避光培养一周，获得白化苗，取白化苗组织5g 以上（叶片等），可多采集一些留做备份样本。

4. 取样后，样本用锡箔纸包裹（或冻存管盛放），迅速过液氮速冻，转移至-80℃冰箱内冻存。

5. 干冰运输。干冰用量建议以3kg/day 计算。一般建议10kg 起。

云生物提供叶绿体/线粒体基因组全图。陕西叶绿体小基因组测序服务

小基因组测序的优点有很多。云南地理谱系遗传小基因组测序售后服务

【参考文献】

Chloroplast genome analyses and genomic resource development for epilithic sister genera Oresitrophe and Mukdenia (Saxifragaceae), using genome skimming data. BMC Genomics, 2018. 云南地理谱系遗传小基因组测序售后服务