上海血液样本抽提外泌体服务

血清样品（有条件的话尽量采用血浆，避免血小板来源的外泌体影响）：

(1) 用**针和普通血清管（不含任何试剂，10ml规格）**10 ml；

(2) 室温静置 30 min，然后4°C条件下，静置3-4小时（此时可见血块析出）；

(3) 用移液器吸取上面的淡黄色血清（应该有4 ml左右）转入15 ml离心管中，4°C条件下 3000g离心15min，小心取上清转入新的15 ml离心管中，**程度保证血清质量；

(4) 离心后的血清15分钟内冻存于-80°C冰箱；

提示：送样量**4 ml以上（分离4 ml血清约需要10-15ml全血）。

    体液样本收集外泌体。抽血技巧：操作要轻柔迅速。试管可翻转8-10次使样本与抗凝剂混匀，避免剧烈摇晃。混匀后，将试管固定垂直放置于离心分离器，在顶部记录抽血的准确时间，因为抽血与离心之间的时间间隔可能是一个影响因素。外泌体在抽血后30分钟内是比较稳定的，若时间过长将导致外泌体数量增加。血小板极易因抽血时的物理因素而***并释放出外泌体，其中包括接触、压力、切力。抽血时间：除了血液黏度，体内血液的各项指标在***中变化很大。生理节律会对血小板的***产生很大的影响。白细胞的募集和循环系统中促炎细胞和***细胞会随时间变化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被证明会随时间变化。目前尚无设计较好的实验对证实不同时间血液中外泌体的变化，故应在相同的时间采集样本。目前饮食是否会对EV产生影响尚未可知，但是由于脂蛋白可运载RNA且食物的摄取可以影响循环脂蛋白颗粒的类型、数量和作用，故抽血可在***一次用餐后一段确定的时间进行。 江苏样本制备外泌体售后服务云生物主营业务包括外泌体抽提和测序。

    Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路：1.作者是怎么发现脑转移的**细胞存在PTEN缺失的呢?又是怎么验证是依赖于脑的环境？其实这点大家都能想到要怎么做（嘿嘿只是没有去做做看，去发现些什么），作者正是把不同来源的**不同转移部位（脑，肺，骨）的基因表达做个热图，发现脑转移的**细胞的共同特点----PTEN丢失，并将原发灶与脑转移灶**细胞进行免疫组化染色，发现PTEN表达正常的原发灶**细胞，转移到脑后PTEN丢失。更有趣的是作者发现，把脑转移的**细胞分离出来培养，PTEN表达回复了；紧接着，作者把这种分离出来的**细胞培养一代后，重新种植到小鼠的脑内和皮下成瘤，发现脑内的PTEN表达又丢失了。得出了***个结论：脑转移灶的可回复性PTEN丢失依赖于脑微环境。

云生物专注于生物医药科研平台服务及基因检测定制，包括测序、芯片、数据库建设、软件开发以及其他科研解决方案和民用型基因检测产品。云生物拥有多个经验丰富、可提供一对一个性化定制分析服务的实验室平台，包括基因调控（ATAC-seq、CHIP-seq、Hi-C测序）、分子生物（数字PCR、荧光定量PCR、焦磷酸测序、PGM）、核酸测序（基因组、转录组、多样性）、芯片检测（基因芯片、蛋白芯片、组织芯片、PCR芯片）、蛋白代谢（蛋白组、代谢组、脂质组）、形态影像（免疫组化）、蛋白定量（定量Wes检测）、细胞生物（细胞生物学、ips、CRISPR/Cas9、细胞株构建）、生物信息（在线系统、软件开发、相关数据库）和转化应用（Microbe Trakr）等等。云生物抽提的外泌体质量上乘。

1、样本采集：

1）.采集方式：不同的方式（手动或电刺激）收集的乳汁会影响其脂肪的含量，皮肤对样本的污染程度也不同。

2). 采集部位：乳房的前后部产生的乳汁成分有一定差异，一般采集相同体积后混合，或者从全乳收集。

3). 样本保存：低温保存。不可冰冻或常温、高温保存。不同的保存容器（玻璃、聚乙烯、聚丙烯等）会通过影响细胞含量而影响外泌体的含量。

2、注意事项

要注意选择对照组，因为有很多因素可以影响乳汁中外泌体的成分，其中包括泌乳阶段、乳汁产量、婴儿哺乳、饮食、代谢状态、生理与心理状态等。例如初乳（1-5天）、过渡乳（6-15天）和成熟乳中蛋白质、脂肪、维生素和抗体的浓度相差很大。 腹水样本外泌体怎么制备？天津粒径外泌体活动

云生物主营产品包括外泌体。上海血液样本抽提外泌体服务

    有些研究证明外泌体miRNA的表达水平在不同生理条件下是会变化的。在健康人血清外泌体中，miR-21的水平比那些恶性胶质瘤患者更低。在非小细胞肺*患者血浆囊泡中，let-7f,miR-20b和miR-30e-3p的水平比正常对照组更低。在良性**和卵巢*中，发现了八种外泌体miRNA的表达水平不同，包括miR-21和miR141。以上研究都表明外泌体的来源细胞有一种分拣机制来指导特异性的miRNA进入外泌体。根据前人的研究，存在一种类型的miRNA，它们更偏好于被装入外泌体，如miR-320和miR-150。miR-320家族***分布于正常组织和**分泌的外泌体中。miR-150在HEK293T细胞株、**患者的外周血、集落刺激因子-1诱导的骨髓来源的巨噬细胞和结肠*患者血清中的外泌体中都有高表达。而且，一些miRNA，如miR-451，在正常细胞来源的外泌体中高表达，如HMC-1细胞株、HEK293T细胞株和初级T淋巴细胞。还有一些miRNA，如miR-214和miR-155，在**细胞株来源的和**患者外周血的外泌体中含量丰富。 上海血液样本抽提外泌体服务