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强化RRBS——高性价比DNA甲基化检测方案。单碱基分辨率，全基因组范围，富集启动子/CpG岛甲基化调控区域，适合人和哺乳动物、动物及鱼类，适合细胞、全血及新鲜冷冻组织，不适合cfDNA及FFPE等片段化样本。项目介绍：简化基因组甲基化测序(ReducedRepresentationBisulfiteSequencing,RRBS)是通过限制性酶切的方法富集基因组DNA上富含CCGG位点的片段，经Bisulfite处理和高通量测序技术进行基因组CpG富集区域内的单碱基分辨率的甲基化测序。相对WGBS而言RRBS技术作为高性价比的甲基化测序方案，测序量大幅减少，在大规模临床样本研究中具有很不错的应用价值。芯片平台作为目前比较成熟的筛选工具。上海WGBSDNA甲基化欢迎咨询

2019年国自然情况：从生命科学部和医学科学部总体来看：2019年度，生命科学部获自然科学基金委批准资助6478项（不含杰出青年基金项目），批准资助金额共计32.71亿元，单项平均资助金额50.49万元。2019年度，医学科学部共批资助10138项（不含杰出青年基金项目），批准资助金额共计44.13亿元，单项平均资助金额43.53万元。甲基化研究整体项目情况分析：从甲基化研究方向来看，与甲基化研究相关的项目总数达283项，项目总金额超过12669万元。其中生命科学部项目总数62项，项目金额3235万元，医学科学部项目总数221项，项目金额9434万元。从2011-2019年甲基化研究方向的项目金额和项目数目分析，整体呈上升趋势；从医学科学部来看，甲基化研究项目获批数量221项，项目金额达到9434万，较之2018年度项目获批金额（7166万元）上升趋势尤为明显，可以看出，甲基化研究日益成为国自然的研究热点。天津hMeDIP-SeqDNA甲基化欢迎咨询中小样本筛选, 大样本中进一步验证。

甲基化研究项目各学科细分分析：从各学科细类中标金额和中标数量分析，**学依然是甲基化研究的热点方向，该方向总计中标金额2217万元，中标数量57项。其它细分学科包括预防医学、遗传学与生物信息学、检验医学也占有不少份额。甲基化研究项目各单位中标情况分析：经过整理，甲基化项目类中标单位共105家单位，按中标项目金额排列如下（截取部分超过百万的项目）。甲基化研究方向细分热点分析："游离DNA甲基化"、"m6A-RNA甲基化"，“羟甲基化”等均是甲基化研究方向的重点关注内容。尤其值得关注的是m6A相关研究近年来呈直线上升态势，成为国自然的热点。

相比之下，VeraCode GoldenGate甲基化分析技术更适合中通量的筛选及验证研究，它以以矩阵微珠芯片(Sentrix Array Matrix(SAM)）形式分析48至384个用户指定的CpG位点。首先，将亚硫酸氢盐处理的基因组DNA 与分析oligo混合，oligo与未甲基化位点的U互补，或者与甲基化位点的C互补。杂交之后，引物延伸，并连接上位点特异的oligo来产生通用 PCR的模板。***，用标记的PCR引物生成可检测的产物。据Illumina的产品**介绍，其产品的**优势在于单个CpG位点的分辨率。其它分析将甲基化定位在一段区域，而通过Illumina分析，你能精确测定某个CpG位点的甲基化水平。在哺乳动物中CpG以两种形式存在。

    Agilent平台因为MeDIP技术本身的特点，都不能到达单碱基的分辨率，而Illumina的Infinium和GoldenGate检测技术却做得到。Illumina的Infinium甲基化检测技术来源与前期的SNP检测，采用的是单碱基延伸的原理。分析利用两个位点特异的探针检测这些序列差异的位点，一个探针是为甲基化位点(M磁珠类型)设计的，而另一个是为未甲基化位点(U磁珠类型)设计的。探针的单碱基延伸掺入了一个标记的ddNTP，它随后被荧光试剂染色。通过计算甲基化与未甲基化位点的荧光信号比例，可确定检测位点的甲基化水平。Illumina公司早期推出的InfiniumHumanMethylation27BeadChip芯片覆盖27,578个CpG位点。这款芯片在医学领域有***的应用，除了和**相关的甲基化筛选之外，也能用于其他疾病相关甲基化检测。因此对这款产品，研究者给予了很高的评价，目前此产品已停产，取而代之的是InfiniumHumanMethylation450BeadChip芯片。它以单碱基分辨率覆盖了基因组中超过45万个甲基化位点，实现了基因区域和CpG岛的***覆盖。此外，还包括CpG岛之外的CpG位点，在人类干细胞中鉴定出的非CpG甲基化位点，以及**和正常组织中差异表达的甲基化位点等等。它的高覆盖度、高通量以及低价格。 基于高通量测序平台的甲基化图谱分析。陕西850K芯片DNA甲基化售后分析

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Sequenom MassArray甲基化检测：服务内容1.根据客户提供的序列信息进行预评估；2.进行样本DNA的分离、纯化、质检及亚硫酸盐修饰。3.使用特殊设计的一对引物扩增样本，得到带有T7RNA聚合酶启动子序列的扩增产物。4.在体外转录体系中，利用T7RNA聚合酶，将扩增产物转录为RN**断。5.利用RNaseA能够特异性识别并切割RNA中U3’端的特性，将RN**断切割成携带有CpG位点的小片断。6.使用sequenom®MassArray飞行质谱分析系统检测产物。由于同一片断中，只有CpG和CpA之间16Da的分子量差别，即质谱图中两者峰的差距。上海WGBSDNA甲基化欢迎咨询