河北粒径外泌体售后服务

    众所周知，成熟的miRNA可以与装配蛋白（assemblyproteins）相互作用，形成一个复合物，称miRISC。miRISC的主要成分包括miRNA、可被miRNA***的mRNA、GW182和AGO2。人类AGO2蛋白，主要结合miRNA5’末端的U或A碱基，能介导mRNA和miRNA结合，介导后续的翻译***或mRNA分子降解。**近研究发现AGO2蛋白和外泌体miRNA分拣机制之间有一种可能的联系。对外泌体蛋白进行分析时，用质谱MS或WBD都有发现AGO2蛋白的存在。Guduric-Fuchsetal.发现敲除了AGO2基因后，会减少那些偏好于进入外泌体的miRNA的类型或丰度，如HEK293T细胞系来源的外泌体中的miR-451,miR-150和miR-142-3p。还有些证据也支持miRISC和外泌体miRNA分拣之间的联系。首先，miRISC的主要成分被发现与MVB（多囊泡小体）有相同定位；其次，阻碍MVB被溶酶体降解会导致miRISC的过度累积，而阻断MVB形成会导致miRISC的丢失；再次，细胞***时出现的miRNA***靶序列水平的变化可能引起外泌体miRNA的分拣。总之，某些miRNA中的特异序列可能指导它们整合入外泌体，而有些酶或其他蛋白质可能也能控制外泌体miRNA的分拣--以一种不依赖于miRNA序列的形式。 外泌体的多种系列总有一款是您满意。河北粒径外泌体售后服务

体液样本收集外泌体，脑脊液。

脑脊液中的外泌体含量虽然较其他体液如血液少，但可作为神经系统疾病的潜在生物标志物。脑脊液相对较为稳定，但仍需注意以下方面：

1、CSF采集时避免CSF受血液污染

2、对照标本的获取

由于健康对照脑脊液获取困难，往往以其他神经异常的患者为对照。需要注意对外泌体的影响。

目前关于外泌体等胞外囊泡的收集，还缺少标准化的样本采集参考标准，需要在实验中不断摸索完善，各位勤劳的童鞋，多多努力，说不定你的方法，会成了标准化的蓝本哟。

血清样品（有条件的话尽量采用血浆，避免血小板来源的外泌体影响）：

(1) 用**针和普通血清管（不含任何试剂，10ml规格）**10 ml；

(2) 室温静置 30 min，然后4°C条件下，静置3-4小时（此时可见血块析出）；

(3) 用移液器吸取上面的淡黄色血清（应该有4 ml左右）转入15 ml离心管中，4°C条件下 3000g离心15min，小心取上清转入新的15 ml离心管中，**程度保证血清质量；

(4) 离心后的血清15分钟内冻存于-80°C冰箱；

提示：送样量**4 ml以上（分离4 ml血清约需要10-15ml全血）。

(1) 用**针和EDTA抗凝管抽取全血，轻柔上下颠倒混匀后室温或者4°C保存，并在1小时内进行下一步处理；

(2) 4°C条件下，使用吊桶式转头1900 g离心10 min，小心吸取上清即为血浆，***500 μl左右丢弃。得到的血浆再次离心，条件为4°C，3000 g，15 min，小心吸出血浆，注意不要碰到底部和侧面的沉淀物；

(3) 将血浆冻存于-80°C；干冰运输。

提示：送样量**4 ml以上（分离4 ml血浆约需要8-10 ml全血）。 云生物专业致力于外泌体服务。

云生物开发了拥有自主知识产权的项目管理系统，该系统是一款针对**科研项目进行实时**及状态反馈的系统软件。该系统实时**项目进展各个环节、提高科研工作者和服务商间的沟通效率、规范项目进度监管，***掌控项目的服务周期，让云生物客户更好的享受服务！本系统软件目前预设了项目展示、项目流程、用户管理、个人设置、系统设置功能模块。项目展示模块集成了项目创建，项目分配，物流商安排，服务商收样，项目报告上传、审核、下载、确认，项目资料（图像文字音视频等）上传、下载 ，离线消息对话，项目周期修正、重新取样，物流商服务商评价，项目删除等操作。外泌体的主要特点有很多。山东血液样本抽提外泌体报价

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细胞上清（需采用去除外泌体的培养基）：

(1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间，贴壁细胞密度在70 %-80 %，悬浮细胞密度在60 %-70 %；

(2) 对于贴壁细胞，去除原有培养基，换为新的不含外泌体的培养基或者无血清培养基；对于悬浮细胞，300 g，4°C，10 min收集细胞；

(3) 使用不含外泌体的培养基或者无血清培养基悬浮细胞并继续培养。细胞继续培养24-48 小时，根据细胞的生长速度确定收取上清时间；

(4) 收集细胞上清，300 g，4°C，离心10 min；小心吸取上清，注意避免吸入细胞或者细胞碎片；

(5)   3000 g，4°C，再次离心15 min，确保将细胞或者细胞碎片去除干净；

(6) 取上清，注意避免吸入细胞或者细胞碎片，合并相同的细胞培养液上清样品，装入无菌的玻璃瓶，可在4°C短期保存（1-2天），长期保存可冻存于-80°C 。建议细胞上清分离后尽快进行外泌体分离，保存在4°C和-80°C，都会对产量有一定的影响。