试剂盒手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法:标本为血清:尽可能将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,取血后必须立即颠倒取血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。2)加样后及时放入孵箱。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。山东生化试剂生产
试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是较后加底物溶液2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。手工洗板时每次加入洗涤液后,应静置15~30s,不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。山东生化试剂生产试剂盒结合在固相载体表面a的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长,在吸取液体时,要用量程和需要量接近的东西去吸,减少误差。务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。人试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了普遍的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。下面分析试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法。选择试剂,选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。加样,可能原因:血清或血浆标本分离不好即进行加样;试剂盒灵敏、特异、简略、敏捷、安稳及易于自动化操作。
试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体。然而,影响试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。试剂盒特点:高效、灵敏、特异的抗体;稳定的重复性和可靠性;吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;节省实验经费。试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。可用于测定抗原,也可用于测定抗体。黑龙江心肌酶试剂报价
试剂盒适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液。山东生化试剂生产
试剂盒根据要检测样品的数量来确定的板条数。每个比对的样品和空白孔是做复孔,而样品的数量就可以自己视情况而定,不过能用复孔的仍是用复孔。将标本液体1:1稀释后倒入50微升的反应孔中。在反应孔中在参加50微升的待测样品,然后马上参加50微升的生物素标记抗体,盖上模板,轻轻摇晃使其混合均匀后,试剂盒在37摄氏度的恒温下等候1小时。将孔内液体甩去,加满洗刷液,震动约30秒后,在甩去洗刷的液体,用纸将水吸干。这姿态重复三次。再在没空参加80微升的亲和链酶素-HRP,同上混合均匀后,在37摄氏度的恒温环境下等候半小时。山东生化试剂生产