HE染色实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。(6)吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可常规HE染色和特殊染色服务。陕西靠谱的HE染色检测

HE染色原理1、细胞核染色的原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。2、细胞浆染色的原理:伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点(4.7—5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。陕西靠谱的HE染色HE染色原理 试剂 染色步骤 注意事项 。

HE染色是目前国内外病理诊断上***采用的常规染色方法。切片质量的好坏,可直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此,能制作出一张高质量的HE染色切片,是必须掌握的技术之一。送检样本经4%多聚甲醛固定,固定状态良好后,严格按照本单位病理实验检测SOP程序进行修剪、脱水、包埋、切片、染色、封片***镜检合格的样片。在显微镜下浏览切片或浏览数字切片,在不同倍数下详细观察组织切片情况,对切片中基本病理改变如充血、淤血、出血、水肿、变性、坏死、增生、纤维化、机化、肉芽组织、炎性变化等情况文字描述,并反映出片子之间的差异。对典型病变部位成像并在word文档中用箭头标识。
HE染色细胞核灰蓝原因:(1)组织处理温度过高、过热,在石蜡停留的时间过长;(2)固定时间太短,接下来就直接在高浓度的乙醇中行脱水处理。对策:理论上来说,加热处理*在组织浸蜡步骤才使用,组织不能在热的蜡液中停留过长时间。如果由于某些原因不能进行下步包埋处理,完成浸蜡处理后的组织,可将组织连同塑料包埋盒一并放置在室温空气中,冷却凝固,以备包埋。待需要包埋时再重新加温直至石蜡融化即可。组织在处理前必须确保固定良好,脱水比较好能从低浓度的乙醇开始。什么是HE染色,HE染色实验的目的。

HE染色细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。HE染色的实验目的以及实验结果分析。陕西靠谱的HE染色检测
脾脏组织HE染色如何观察。陕西靠谱的HE染色检测
HE染色切片中出现类似色素样的点状结晶和黑色光滑的细胞核原因:切片封片前放置在空气中时间太长,以至于二甲苯挥发切片干燥所致。对策:移去组织切片上的盖玻片和封固剂,重新处理。将切片水洗数分钟,然后重新脱水、透明、封固。封片过程中要保持组织切片的轻度湿润,尽量不要让其干燥。细胞核呈红、棕色改变原因:苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。对策:首先,每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力,发现氧化过度应及时更换。其次,可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氢钠等,在苏木精染色后,给切片以足够的蓝化时间。陕西靠谱的HE染色检测
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