甲基化-焦磷酸测序(升级版)之前的仪器是Q96,也就是说同时可以上96个反应,但是有效读长只有50bp左右(50bp之后开始衰减,后面的序列只能作为参考);升级版的Q48,也就是48孔,每次上48个反应,但有效长度可以到100bp左右,而且之前很多不能测过去的特殊结构,现在大部分也能测了。甲基化--------焦磷酸测序的优势。样品要求·样品类型细胞、新鲜组织或DNA样品·样品量细胞样品请提供至少1×106个细胞,组织样品请提供至少100mg的组织块或切片,DNA样品请提供1μg以上的DNA·样品质量基因组DNA无明显降解,主带清晰,大于23Kb,无明显弥散。OD260/280值在~,浓度≥50ng/μl·样品保存细胞样品或新鲜组织块(切成~50mg的小块)可液氮冻存后,-80℃保存。DNA样品可溶于乙醇或超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融·样品运输样品置于ml冻存管中,封口膜封好。 基于高通量测序平台的甲基化图谱分析。广东Chip-seq技术服务
重亚硫酸盐处理结合测序是目前检测甲基化的金标准。除了全基因组甲基化测序技术等研究手段,对于大样本量甲基化研究来说,更需要灵活、有针对性的技术方案。NGS-BSP方法适合几个到几十个基因或者位点进行大样本甲基化测序或者验证项目,具有更快速的实验周期及低成本优势。技术优势高效灵活的目标区域甲基化检测的工具BSP和高通量测序完美结合,单碱基分辨率适合几个到几十个位点的大样本验证项目适合所有动物样本、周期快、检测位点灵活、性价比高科学方案设计从项目背景了解、协助方案设计、实验材料选取、建库测序,到数据分析每个项目有特定的科学问题;需要专业、有价值的建议;科学、缜密的设计及时高效的沟通;以保障高质量研究成果样本要求:基因组DNA:>=1ug(20个区域/位点);样品浓度>30ng/ul;无RNA和蛋白污染建库测序:测序策略:IlluminaHiSeq,PE150;测序深度:>。 广东cfDNA甲基化技术服务售后服务云生物提供DNA甲基化和羟甲基化的表观实验和信息分析技术服务。
DNA甲基化是在DNA甲基化转移酶(Dnmt)的作用下将甲基选择性地添加到胞嘧啶上形成5-胞嘧啶的过程,刚被发现时被定义为第五种碱基,实际上它是一种重要的表观遗传学标记,在调控基因表达、维持染色质结构、基因印记、X染色体失活以及胚胎发育等生物学过程中发挥着重大的作用,它就像魔术师手中一顶**神奇的“帽子”,带给世人层出不穷的惊喜。DNA甲基化的发生、保持和去除都处在生物体精细的调控中,一旦发生紊乱,对于动物而言将导致胚胎死亡或者**等重大疾病,对于植物而言将会出现各种的表型缺陷,那么这顶神奇的“帽子”是如何发挥它神奇功用的呢?这个问题成为整个生物界**热的研究焦点之一。研究者们从DNA甲基化的发生机制,保持机制到去甲基化机制,从基因组甲基化状况研究到特异位点甲基化状况研究,从**初CpG位点的研究到non-CpG位点的研究,从高甲基化研究到低甲基化、未甲基化研究,以及与其密切相关的羟甲基化也慢慢进入人们的视野,***多角度解析DNA甲基化。在Nature、Science、Cell等**杂志上经常能看到它熟悉的身影,说它是生物学研究的“宠儿”一点都不为过。正所谓“工欲善其事,必先利其器”。
安捷伦公司芯片平台因其强大的eArray探针设计平台,可以进行芯片的定制。在甲基化领域同样适用。合作伙伴利用Agilent芯片平台设计了一款专门针对**启动子区域CpG岛的甲基化芯片。绝大多数基因是针对基因的启动子区域的CpG岛设计探针。这款芯片上一共有4160个功能注释比较明确的基因,其中2128个和**发生有关系。从功能上分,有256基因和细胞凋亡有关,1273个基因和信号传导有关,487个基因和压力和衰老有关。采用的是8*60K的芯片格式。利用MeDIP原理进行甲基化检测的方法探针的分辨率可以精确到100 bp。通过甲基化数据,筛选疾病耐药的差异甲基化。
MethylationEPICBEadChip兼具***的覆盖范围和高通量功能,因此是EWAS的理想之选。其他优势包括:***的全基因组覆盖范围(>850,000个甲基化位点)CpG岛非CpG和差异甲基化位点FANTOM5增强子ENCODE染色质ENCODE转录因子结合位点miRNA启动子区域实验分析方法重现性98%(针对技术性重复)98%(针对传统HumanMethylation450K芯片对照,MethylationEPIC芯片采用的相同样本)>90%(针对HumanMethylation450K位点内容)用户友好的简化工作流程与FFPE样本兼容MethylationEPICBeadChip遵循用户友好的简化的工作流程,可以从低样本起始量(低至250ng)同时处理多达96个样本该甲基化芯片针对常规样本和FFPE样本提供单CpG位点级别的定量测量,因此能实现超级精细的解析度,方便用户了解表观遗传的变化。 RRBS开发的初衷就是为人和哺乳动物,提供全基因组范围的、高性价比的甲基化检测金标准方案。浙江焦磷酸测序技术服务专业服务
cfDNA,cell free DNA,就是血液中游离的自身DNA。广东Chip-seq技术服务
cfDNABS-Seq送样要求一、送样类型分离好的血浆二、保存方式分离后的血浆,用ml离心管分装,例如:1ml/管;放-20℃冰箱中保存(短暂保存,1-2周);放-80℃冰箱中长期保存(1年以内);保存期间不能冻融。三、运输条件干冰运输:顺丰陆运(3-4天时间),夏季10-15公斤干冰;秋冬季10公斤干冰。四、抽血要求1、使用Streck**管(不建议使用普通的EDTA-钠抗凝管),采集10ml外周静脉血(客户没有Streck**管,公司配送);2、室温或者放置4℃冰箱中半小时以上,不超过8小时,进行血浆分离步骤。五、血浆分离步骤1、4℃条件下以1600g离心10min,离心后将上清(血浆)分装到2、4℃条件下以16000g离心10min去除残余细胞,将上清移入新的离心管中,每管分装1ml;3、血浆样本存放于-80℃冰箱中保存;使用干冰运输,提取之前不能冻融。备注1:血浆分离在4℃条件进行,如果客户没有冷冻离心机,也可以在室温条件下进行;备注2:离心后取血浆上清,避免吸取白细胞;通常10ml全血可以获得4-5ml血浆。 广东Chip-seq技术服务