血小板裂解液对DPSCs、SCAP和PDLSCs体外增殖、矿化的影响以体外二维平面培养或复合HA-TCP支架三维培养的DPSCs、SCAP和PDLSCs为靶细胞，研究不同浓度PL对牙源性干细胞增殖及矿化的影响。结果发现：PL对DPSCs的增殖、成骨/成牙本质分化的干预效应与其在培养体系之中的相对浓度、细胞培养的空间模式密切相关；平面及三维培养模式下，5%PL均能够明显促进DPSCs的增殖分化（P＜），同时扫描电镜及组织学观察结果显示，该浓度PL处理组样本在体外三维培养至第14天时，能够形成大量胶原纤维包绕于细胞膜片-支架材料复合体表面；而对于体外三维培养模式下的SCAP和PDLSCs，5%PL同样能够明显促进细胞增殖及矿化基质的形成，并有助于在支架材料上形成完整的细胞膜片样结构，且PDLSCs对于以上效应的应答更为明显。同时SCAP在培养至第7天时，即形成大量胶原纤维包裹于细胞膜片-支架材料复合体表面。4.血小板裂解液对DPSCs、SCAP和PDLSCs的体内组织再生能力的影响体内研究结果发现：将经不同浓度PL体外培养14天的DPSCs/HA-TCP支架复合体植入裸鼠背部皮下12周后，发现PL处理组具有更强的体内构建硬组织能力（P＜），而5%PL能够明显提高DPSCs在人离体牙根管腔内再生牙体组织的能力。用血液里的血小板浓缩物反复冷冻/解冻和超声处理可制备成人血小板裂解液。进口血小板裂解液的有效成分
本课题在体外分离、培养和鉴定人牙髓干细胞、牙周膜干细胞及根尖牙rutou干细胞的基础上，通过比较体内、外不同培养模式下，血小板裂解液对这三种牙源性干细胞增殖及分化的影响，以期找到PL应用于牙源性干细胞培养、诱导分化的较好方式，为研究相关机制及组织工程应用提供实验基础，同时为将来PL在临床zhiliao方面的应用提供新的思路。结果如下。1.牙髓干细胞、根尖牙rutou干细胞和牙周膜干细胞的分离、培养和鉴定使用酶消化法或组织块法分离获得人原代DPSCs、SCAP和PDLSCs，利用有限稀释法克隆化培养以纯化传代细胞；采用免疫细胞染色及流式细胞仪鉴定细胞STRO-1等表型，确定所获细胞的间充质干细胞属性。采用成脂诱导及成骨/成牙本质诱导验证细胞的多向分化能力。2.血小板裂解液的制备及相关培养体系的建立使用10人份机**小板，混合后利用冻融裂解法制得满足实验需要的血小板裂解液PL；将PL制成品以一定的体积浓度比加入普通培养基及矿化诱导培养基配制成条件培养液；将扩增培养所获的牙源性干细胞以平面培养或复合HA-TCP支架培养，营造不同的细胞培养空间环境。
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为了排除肝素对于细胞增长的抑制作用可能与防腐剂（这里采用苄醇作为防腐剂添加到UFH或LMWH中）有关。我们对不添加防腐剂的肝素进行了相同实验，结果对AT-MSC和BM-MSC细胞增殖抑制趋势相同。在随后的传代培养到3代中的累积的群体中，两种肝素UFH和LMWH对MSC增殖的影响也变得明显，血小板裂解液中肝素浓度较低时累积细胞群体倍增指数(cPD)较高，CFU-F的塑料粘附生长性能是MSCs培养的先决条件，在96孔板中通过有限稀释的方法结合泊松统计进行CFU-F试验，显示集落形成率CFU-F在高浓度UFH时中度降低，而在高浓度Enoxaparin（LMWH）时明显降低。这些结果表明高浓度的LMWH减少了CFU-F的形成，这与已报道的其他研究结论一致。
细胞zhiliao的生产是一项费时又昂贵的工程。优化生产工艺通常会涉及优化培养参数去减少时间、降低成本，同时提供呈现预期疗效的表型。细胞增长所需的培养基补充剂也是整个细胞生产工艺中的一个较关键的因素。胎牛血清（FBS）一直以来被作为是细胞培养的常用补充剂，但因涉及伦理和安全问题，如今从加工过的血液中提取的人源培养基补充剂已经得到越来越多的使用，血小板因其在血栓形成中的作用而闻名，很近，血小板被认为是伤口部位再生过程的关键介质。血小板裂解过程中释放的生长因子和细胞因子可调节局部免疫应答，并启动局部组织的加速恢复(图1)。考虑到血小板在人类生物学中这些作用，也就不难理解为什么处理过的血小板裂解液能够给细胞培养基提供可靠的促生长特性了。血小板裂解液为什么要使用肝素？
血小板裂解液解冻后请立即进行培养基的配制，配置好的培养基在2-8°C环境下保存并尽快使用，不建议超过21天。如解冻后的原瓶无法全部使用，建议按需分装成合适的小瓶中进行-20°C保存一旦产品瓶或袋经过初始解冻过程，建议尽快将产品置于基础培养基中。尽管对于储存在2-8°C的准备好的含有hPL的培养基，Sexton的内部测试有效期为21天，但建议客户进行内部验证研究，以确定其基于血小板裂解液的完整培养基的有效期，使用的基础培养基和添加剂等变量可能会缩短或延长完整培养基产品的有效期。人源血小板裂解液是一种能有效支持间充质干细胞等人类细胞生长的高效细胞培养补充剂。临床等级血小板裂解液沉淀
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PLBioScience成立于2015年，是德国亚琛工业大学的一个分支机构。2013年，他们的首席执行官Dr.HatimHemeda从事干细胞研究：他用自己的血小板浓缩液取得了很好的结果。由于当时没有商用，他开发了一种受保护的技术，用于大规模生产人血小板裂解液，致力于为用户提供安全和无动物成分的细胞培养补充剂的解决办法。PLBioScience质量申明：PLBioScience重视客户需求，努力为他们提供满足甚至超越他们期望的产品和服务。公司的hPL来源于输血级的血小板，在无菌条件下通过大量混合的血小板单位进行生产，批次和批次间的稳定性保证了客户可重复的实验证据。血源的持续供应确保客户对于hPL获得稳定的供货及价格。所有产品都经过充分过滤，测试和认证。进口血小板裂解液的有效成分
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