病理实验外包,病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,明显缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断。一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包所需样本如何保存。宁夏组织病理实验外包检测
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。宁夏组织病理实验外包实验室病理实验外包检测|组织检测|科研课题外包|实验外包服务。
病理实验外包,病理染色组织脱水注意事项:1.脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2.在更换高一级的脱水剂时,比较好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3.在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4.在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。5.如需过夜,应停留在70%酒精中。6.脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。病理实验外包研究整体解决方案_英瀚斯生物。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍尼氏染色:神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代替粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以只突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中,但不在于轴突和胞体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化,尼氏体是神经元内蛋白质合成的重要部位,当神经元受到刺激后,胞体内的尼氏体会明显减少。通常尼氏体能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。尼氏染色可清晰的显示出尼氏小体定位,判断神经细胞是否受损。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。代做实验,病理实验外包检测,实验样本检测。福建真实病理实验外包实验室
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病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。宁夏组织病理实验外包检测