一直以来，病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比，NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列，测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大，其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本，研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性，丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本，无法通过PCR进行富集，要鉴定其种类需要调用各种方法，逐个尝试，工作量之大，其效率之低，使得一个新的研究方法的出现及其必要。病毒全基因组测序要注意什么事项？病毒全序列测序进化分析方法
在探普生物进行病毒基因组测序的流程是怎么样的？在探普生物进行病毒基因组测序非常简单，简而言之，客户只需要说清楚样品情况，准备样品即可，其他事宜都由探普来进行安排。大致流程如下：1)与销售人员沟通项目需求和样本情况；2)探普生物工作人员拟定项目合同，双方协商合同内容后签字盖章；3)按样本准备指南准备好样本，填写信息单后通知销售人员预订干冰，安排样本寄运输；4)客户支付项目启动款，探普生物启动项目实验和分析并提供测序报告；5)客户支付项目尾款，探普生物提交测序数据和分析结果；6)售后问题处理，项目结题。深度测序进化分析方法病毒全基因组测序具有的特点：无需培养和特异性扩增，对采集临床样本直接检测。
病毒全基因组测序定在探普生物长时间运行过程中，我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先，从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因，搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费，同时能达到研究目的。此外，有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究，如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组，可能需要对病毒的全基因组进行测序以后，结合其他上下游的研究数据，达到研究或者监测疫病的目的。
高通量基因组测序中，什么是测序深度和覆盖度？测序深度是指测序得到的总碱基数与待测基因组大小的比值。假设一个基因大小为2M，测序深度为10X，那么获得的总数据量为20M。覆盖度是指测序获得的序列占整个基因组的比例。由于基因组中的高GC、重复序列等复杂结构的存在，测序终拼接组装获得的序列往往无法覆盖有所的区域，这部分没有获得的区域就称为Gap。例如一个细菌基因组测序，覆盖度是98%，那么还有2%的序列区域是没有通过测序获得的。病毒全基因组测序具有的特点：独有的一定定量技术，实现病原定量分析。
病毒全基因组测序，高通量测序技术的发展在生物信息学分析方面，通过新的分析软件的研发和原有分析软件的升级，对测序所得数据的分析也变得更加可靠；除此之外，伴随着BasSpace等服务的出现，进行数据分析工作所需的设备成本也在逐步降低。将来，伴随着高通量测序技术与数据分析技术的不断进步，测序精度与可靠性的上升，测序与数据分析成本的下降，高通量测序技术会在各个领域得到应用。在病原微生物检测和鉴定应用中，高通量测序技术势必会成为不可或缺的技术并发挥越来越重要的作用。高通量测序实验足够灵敏和完善，方能获得准确、可信任的结果。病毒全基因组测序具有的特点：采用高通量测序仪，全流程质控。深度测序进化分析方法
测序的完成程度，决定着基因组的下游应用。病毒全序列测序进化分析方法
能实现对病毒的全基因组进行测序的技术手段：早期在高通量测序技术普及之前，对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后，可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高，读长很长，但与此同时，扩增和克隆工作费时费力，由于流程繁琐，加上快速变异导致引物无法通用，该方法对于大量基因组的测序工作而言，可操作性不强，这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后，研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析，减少了工作量，增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试，开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序，该流程自运行以来广受研究者们好评。病毒全序列测序进化分析方法
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