深圳红外荧光寿命成像使用步骤

荧光寿命成像在生物医学研究和临床诊断应用中的许多场合都对多光谱分辨提出特殊要求，如在FRET测量中，要求能同时测量供体和受体的荧光强度随时间的衰减，多光谱分辨的荧光寿命成像提供了一种新的定量研究手段．目前，基于门控像增强器的多光谱宽场FLIM 技术一次只能获得至多两个谱段的荧光寿命图像，而基于TCSPC的多光谱分辨FLIM的成像速度又很低，这些都限制了其应用范围．目前的一个研究方向是，发展光谱分辨率高、成像速度快、价格低廉的多光谱分辨荧光寿命成像显微技术。影响荧光寿命成像测量的因素有哪些？深圳红外荧光寿命成像使用步骤

荧光寿命成像技术及其在生物医学中的应用：荧光分子的寿命就像荧光分子的激发光谱和发射光谱一样是荧光分子的固有特性，随着近年来对蛋白及分子功能研究的不断深入，科研工作者除对多色成像、钙成像等功能成像的需求日渐增多之外，对荧光寿命成像的需求也逐渐增加，而荧光寿命成像能提供除荧光强度、荧光光谱信息之外的荧光分子的寿命信息，可用于分子间相互作用（FRET）、分子所处微环境的离子浓度（如Ca2+、pH）及细胞代谢水平的改变等测量，并可拆分光谱重叠的荧光染料及染料和自发荧光，还可以结合荧光相关光谱对单分子实现荧光寿命相关光谱FLCS的测量。荧光寿命成像扩展了传统荧光成像的维度，是功能成像的理想工具，在生物医学领域有广阔的应用前景。北京分子荧光寿命成像怎么样荧光寿命成像具有200 nm的空间分辨率和皮秒量级的时间分辨率。

荧光寿命是荧光分子在激发态停留的时间，这个时间可以反映荧光分子的内在属性和所处的微环境，是一个很有用的工具。以往，荧光寿命的测量和计算是件非常复杂和耗时的工作，只有少数专业的科学家关注和使用该工具。传统的多色成像实验根据光谱差异来设计，会有串色等限制，而且需要多次采集图像，会造成样品的光损伤。通过荧光寿命来进行成像，只需要拍摄一次就完成图像采集，不但减少了成像时间，而且降低了激光对样品的损伤。荧光寿命成像使用简单，方便快捷，不需要进行参数调节。

市场上荧光寿命的测量方式可分为时域法和频域法，两者在本质上是相通的，测量精度相近，频域技术是时域法的傅里叶变换的延伸。时域和频域技术在各种显微寿命成像平台中都有应用，时间相关单光子计数方法（TCSPC )是常见的时域技术，而新兴的数字频域技术（FastFLIM™ )则取代了传统的模拟频域技术，凭借其独恃的优势成为应用广的频域技术。荧光寿命成像主要通过TCSPC技术（Time-Correlated Single Photon Counting）实现。由于TCSPC系统，一个激光脉冲只采集一个光子信号，所以激光器的重复频率决定了系统的数据采集速度。重频越高，采集速度越快，数据信噪比越好。荧光寿命成像技术有两种：时间域和频率域。

荧光寿命成像FLIM在生物学上的应用根据荧光分子种类可以分为三种：分别为自发荧光FLIM、外源分子探针FLIM和FRET-FLIM。自发荧光FLIM被普遍应用于非标记生物成像领域。所谓自发荧光，即生物细胞本身便包含荧光分子，称为内源性荧光分子团。FLIM通过对自发荧光分子团（如NAD(P)H和FAD）荧光寿命的考察，可以实现细胞代谢的监测。这种方案无需人为对样品加入荧光试剂便可以发射荧光，有效减少了荧光染料对样品的毒性、荧光分子与样品的非特异性结合及染料对生理性能的干扰影响。荧光寿命显微成像，可以定位不同的分子及浓度分布，在生物，材料，半导体领域具有重要的应用价值。天津荧光寿命成像操作步骤

荧光寿命成像（FLIM）对细胞信号传导及调控，蛋白间的相互作用等生物研究发挥着很大作用。深圳红外荧光寿命成像使用步骤

在种类繁多的显微技术中，荧光寿命显微成像技术（FLIM）具有对生物大分子结构、动力学信息和分子环境等进行高分辨高精度测量的能力，因此其重要性日渐提升，被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。荧光的特性包含有：荧光激发和发射光谱、荧光强度、量子效率、荧光寿命等,其中，荧光寿命是指荧光分子在激发态上存在的平均时间（纳秒量级）。分子的荧光寿命在几纳秒至几百纳秒之间，因此，测量荧光寿命需要极快响应时间的探测器。荧光寿命成像的发展很好地弥补了基于强度成像的问题，对生物医学检测有着重要的意义。深圳红外荧光寿命成像使用步骤

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