分光光度计的简单原理:分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量:核酸的定量是分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。 光源必须具有足够的输出功率和稳定性。高校紫外可见分光光度计
紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现***产与管理部门,紫外可见分光光度计都有***而重要的应用。分光光度计是杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人在1854年将朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律应用于定量分析化学领域,并且设计了***台比色计。到1918年,美国国家标准局制成了***台紫外可见分光光度计。此后,紫外可见分光光度计经不断改进,又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器,使光度法的灵敏度和准确度也不断提高,其应用范围也不断扩大。目前市场上有两类主流产品:扫描光栅式分光光度计和固定光栅式分光光度计。 常见紫外可见分光光度计报价仪器分辨率越高,表明该仪器能比较好地将两相邻谱线分离而没有重叠。
在分光元器件方面,经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅的过程,商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。在仪器控制方面,随着单片机、微处理器的出现以及软硬件技术的结合,从早期的人工控制进步到了自动控制。在显示、记录与绘图方面,早期采用表头(电位计)指示、绘图仪绘图,后来用数字电压表数字显示,如今更多地采用液晶屏幕或计算机屏幕显示。在检测器方面,早期使用光电池、光电管,后来更普遍地使用光电倍增管甚至光电二极管阵列。阵列型检测器和凹面光栅的联合应用,使仪器的测量速度发生了质的飞跃。
样品吸光度会受到透射比的强烈影响,两者之间存在A=logT这个关系式,其中A指的是样品吸光度,T指的是透射比,当投射比也就是T的误差较大的时候,那么就会使样品吸光度也就是A的误差更加大。所以,假如透射比不够准确,那么就会影响到紫外可见分光光度计检定中的数据的准确性,透射比的准确性会受到波长,比色皿托盘不正,光密封不到位,光谱带宽变化等等因素的影响,导致透射比的误差超出范围,从而导致仪器测量的不准确性可能加大。怎么维护紫外可见分光光度计:库仑计的发生电极对应相互隔离。
紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱,来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。食品安全紫外可见分光光度计设备
关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。高校紫外可见分光光度计
紫外可见分光光度计等光谱分析仪器的主要部件:光源光谱分析中,光源是提供足够的能量使试样蒸发、原子化、激发,产生光谱。光源必须具有足够的输出功率和稳定性。由于光源辐射功率的波动与电源功率的变化成指数关系,因此往往需用稳压电源以保证稳定或者用参比光束的方法来减少光源输出对测定所产生的影响。光源为连续光源和线光源等。一般连续光源主要用于分子吸收光谱法;线光源用于荧光、原子吸收和Raman光谱法。单色器单色器的主要作用是将复合光分解成单色光或有一定宽度的谱带。单色器由入射狭缝和出射狭缝、准直镜以及色散元件,如棱镜或光栅等组成。高校紫外可见分光光度计
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