多倍率显微镜

    显微镜的观察方式，你知道几种？明场成像是常见的显微镜观察方式，也是观察生物样品和材料样品常用的观察方式。观察不透明的材料样品，反射光明场是使用较多的观察方式。光源直接照射到样品表面，表面的结构对照射光有不同程度的反射和吸收，图像的亮暗就反映样品表面的粗糙度和吸光情况。暗场成像与明场成像相对应，顾名思义，人不会直接观察到照明光线，而是光线斜射到标本的表面，根据丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光进行反射或衍射，增大了人眼可见性，我们才能够观察到极其微小的物体。相差也是一种很常见的观察方式，用来进行活细胞成像。由于细胞在明场下轮廓不清，虽然可以观察到，但其边界或内部结构无法分辨清楚。相差利用光程差（相位）这种人眼无法区分的技巧，光通过不同厚度标本时的光程差转变为人眼可以观察到的明暗变化，从而对标本的结构有了区分。透射电子显微镜和扫描电子显微镜；多倍率显微镜

显微镜常见故障的排除：

一、显微镜灯泡不亮1、检查电源线是否有松动，插座是否正常。2、检查保险丝是否烧断（保险丝多在机身电源接口处），如烧断了则更换保险丝。3、更换备用灯泡，注意在更换过程中不要手指直接接触到灯泡。

二、显微镜无法对焦成像1、检查调焦限位机构是否没调节好，导致工作距离不够。2、检查样品是否放反。

三、低倍下成像清晰，高倍下成像较模糊1、高倍下对样品厚度和平整度有更高要求，检查样品是否平整。2、盖玻片位置是否放反，注意盖玻片朝上。3、生物显微镜应注意100X物镜是否滴油，物镜是否干净。4、切换到高倍镜时，聚光镜上的孔径光阑相应调大。

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显微镜的观察方式，你知道几种？

荧光成像在如今的科研中已经广泛应用，无论是荧光免疫组化染色、融合蛋白转基因表达，还是荧光染料染色，这些方式都对蛋白的定位和定量分析，细胞的动态变化，组织结构的观察，蛋白的共定位起到重要的影响。荧光成像的原理基于荧光分子获得能量后从高能态跃迁回低能态所释放出的荧光信号。激发这种状态可以使用各种光源，例如普通荧光显微镜使用的金属卤化物灯，LED荧光灯，共聚焦显微镜和双光子显微镜使用的激光。

需要记住的是，不同的荧光成像方式适合不同的研究对象：✓由于sCOMS相机的快速成像特点，在钙成像上普通荧光显微镜具有速度优势。✓共聚焦较好的信噪比和分辨率特点适合多色高分辨高对比成像。✓利用双光子光漂白少的特性，对活细胞或动物成像具有优势。✓利用不同的染料和荧光蛋白特性，还可以进行更多更复杂的荧光成像实验。材料样品也不甘寂寞，它们不像生物样品那样需要特定的染料进行标记，一般都是以自发荧光的方式来呈现它们多彩的一面。比如树脂材料，纤维等样品，利用这一特点可以对样品进行缺陷检测等应用，为科研和生产提供保障。

聚焦离子束（FIB）显微镜

随着纳米科技的发展，纳米尺度制造业发展迅速，而纳米加工就是纳米制造业的重要部分，纳米加工的代表性方法就是聚焦离子束。近年来发展起来的聚焦离子束（FIB）技术利用聚焦离子束对材料进行纳米加工，配合扫描电镜（SEM）等高倍数电子显微镜实时观察，成为了纳米级分析、制造的主要方法。目前已广泛应用于半导体集成电路修改、切割和故障分析等。

技术特征

1、比较高束流可以达到100nA,且加工性能优异。可以实现快速切割和纳米加工。

2、最高分辨率小于3nm，可以实现精细加工，并显示优异的FIB成像质量。

3、电压范围在500V-30KV可调，可以实现精细抛光，降低样品表面非晶层厚度。

4、离子源比较稳定，使用寿命长。行业内**长离子源寿命1500小时（3000uAh），72小时束流变化在5%以内。5、与SEM镜筒完美配合，可以实现FIB加工过程中可以利用SEM进行实时观察。 体视显微镜的光路设计；

显微镜的观察方式，你知道几种？霍夫曼调制相差（HMC）利用斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。霍夫曼调制相差不会因在光路中使用双折射材料而受到阻碍，因此该技术对于检查由聚合材料制成的容器中的样本更为有用。而它不利的一面是，HMC会产生许多光学伪像，使该方法用于在玻璃盖玻片上进行贴壁细胞成像时比相差或DIC效果差。当斜射光照射到标本产生折射、衍射，通过物镜相衬板产生不同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。体视显微镜的广泛应用；体视 显微镜加装

视频显微镜和金像显微镜。多倍率显微镜

共聚焦显微镜技术下一步的研究重点应该集中在以下几点：1、更快的扫描速度目前共聚焦扫描速度受限于扫描设备的机械结构，要想获得更快的扫描速度只能牺（xi）牲分辨率。而很多生物过程非常迅速，目前仍然无法检测。2、更wan美的超高分辨率技术目前超高分辨率技术有STORM、PALM、STED和SSIM几种技术，分辨率从20～200nm不等，但是各种技术均有一定缺陷，例如在样品处理、Z轴方向、光毒性等方面还不近wan美，在实际观察中往往很难达到极限分辨率。3、更强的兼容性共聚焦显微镜技术涉及到多种激发方式，例如多光子和光片式观察，相干反斯托克斯拉曼散射在理论上可以公用一套激光系统。超高分辨率显微术可以搭配白激光技术。多倍率显微镜

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