扫描探针显微镜根据所利用的探针与样品之间相互作用物理场的不同,被分为不同系列的显微镜。其中扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)是比较常用的两类扫描探针显微镜。扫描隧道显微镜是通过检测探针与被测样品之间的隧道电流的大小来检测样品表面结构。原子力显微镜是通过光电位移传感器检测针尖一样品间的相...
扫描透射电子显微镜兼具扫描成像与透射分析的特点,其仪器结构可看作SEM与TEM的结合。STEM主要由电子枪、电子光学系统、样品室、环形探测器与成像设备等组成。STEM与TEM的主要区别在于添加了扫描附件;与SEM的不同在于电子信号探测器安置在样品下方。
优缺点:
优点:(1)成像质量高,受样品厚度与仪器干涉小(2)可达到原子分辨率(3)结果分析简单、直观(4)能够快速获取样品的综合信息,成像效率高。
缺点:(1)制样时间长,对样品的要求高;(2)一些材料在高能电子束中不稳定;(3)测试成本高,仪器分布稀少。 扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)是比较常用的两类扫描探针显微镜。定制显微镜按需定制
显微镜聚光镜
在照明系统中,聚光镜的作用是比较大限度地把光线聚集起来,投射到显微镜的成像系统中。基于聚光镜的功能,对聚光镜像质的要求为球差和色差,以和显微镜物镜的像差相适应。
显微镜色差
一般在设计时,只在可能条件下取得最小值即可,故聚光镜的选料很重要。聚光镜的材料宜选用低色散的光学玻璃(如K9玻璃)。由于位置色差在视场中叠加的结果是在其边缘出现彩色现象,只要使照明的区域大于标本的尺寸就能避免色差的影响。但是,对柯勒照明来说,要求聚光镜把它的光阑成像在物面上,避免色差影响以消色差聚光镜的方案替代了。消色差聚光镜的结构类似于高倍显微镜物镜,只是焦距比较长,以使光束能够通过较厚的载物玻璃(约2mm)照亮标本。
球差存在将影响聚光镜对光线的聚集能力,降低照明的效果。
定制显微镜按需定制体视显微镜的光路设计;
共聚焦显微镜技术下一步的研究重点应该集中在以下几点:1、更快的扫描速度目前共聚焦扫描速度受限于扫描设备的机械结构,要想获得更快的扫描速度只能牺(xi)牲分辨率。而很多生物过程非常迅速,目前仍然无法检测。2、更wan美的超高分辨率技术目前超高分辨率技术有STORM、PALM、STED和SSIM几种技术,分辨率从20~200nm不等,但是各种技术均有一定缺陷,例如在样品处理、Z轴方向、光毒性等方面还不近wan美,在实际观察中往往很难达到极限分辨率。3、更强的兼容性共聚焦显微镜技术涉及到多种激发方式,例如多光子和光片式观察,相干反斯托克斯拉曼散射在理论上可以公用一套激光系统。超高分辨率显微术可以搭配白激光技术。
共聚焦主要的观察对象是荧光。通俗来讲,是指用波长短的光照射某物质,该物质被照射时,由于光激发原理,能发射出比照射光波长较长的光,后者即为荧光。我们观察的荧光物质主要为荧光蛋白或荧光染料,可能样本本身也会有一些自发荧光。具体到共聚焦显微镜上,就是用不同的激光器去激发样本中的荧光染料,使之发射不同的荧光,就可以得到多色荧光图像了。不管是荧光染料还是荧光蛋白,或是其它荧光材料,都有其荧光特性,主要指激发光(Ex)-Excitation与发射光(Em)-Emission。我们常说的488,543,633就是指相关荧光材料的激发光,但要注意,无论激发光还是发射光,都不是一个数值,而是一段波谱,只是为了日常使用方便才使用488nm这样的波谱峰值(Ex-Max)。体视显微镜的放大倍数一般在5-100倍之间, 一般有透射光,斜射光和外部环形光源等照明方式。
什么是体视显微镜?
体视显微镜,又称“实体显微镜”“立体显微镜”或称“解剖显微镜”,是一种具有正像立体感的显微镜,应用于材料宏观表面观察、失效分析、断口分析、生物学、医学、农林、工业及多种应用场景。
体视显微镜均采用两个单独的光学通路,对物体成像后的两光束被两组中间物镜----变焦镜组分开,并组成一定的角度称为体视角一般为12度--15度,再经各自的目镜成像,分别进入人的两只眼睛,每只眼睛看到的标本成像都不一样。这些额外的信息允许大脑通过融合左右图像来重建物体的三维图像。所以体视显微镜的成像拥有常规正置显微镜或者倒置显微镜所没有的立体感。当人们需要与标本进行互动时(例如解剖,筛选,微型雕刻,显微操作等),体视显微镜是很好的选择工具。 体视显微镜的工作原理;南昌显微镜分类
显微镜的使用方法及步骤;定制显微镜按需定制
共聚焦显微镜是由显微镜光学系统、激光光源、扫描器及检测及处理系统4部分组成,采用相干性较好的激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对图象进行处理的一套观察、分析和输出系统。激光扫描束通过光栅针(zhen)孔形成点光源,经过分光镜反射至物镜,聚焦在在标本上并进行扫描。样品受到激发后,发出的荧光回到分光镜聚集到探测针(zhen)孔,之后经过光电倍增管转化为电信号传输到计算机上显示为清晰的焦平面图像。激发光通过光栅针(zhen)孔聚焦在样品上,荧光通过物镜聚焦在针(zhen)孔上,此过程中形成两次聚焦,故被称为共聚焦显微镜。
主要应用于:生物学领域、高分子化学领域、表面粗糙度领域。 定制显微镜按需定制
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扫描探针显微镜根据所利用的探针与样品之间相互作用物理场的不同,被分为不同系列的显微镜。其中扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)是比较常用的两类扫描探针显微镜。扫描隧道显微镜是通过检测探针与被测样品之间的隧道电流的大小来检测样品表面结构。原子力显微镜是通过光电位移传感器检测针尖一样品间的相...
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