扫描探针显微镜根据所利用的探针与样品之间相互作用物理场的不同,被分为不同系列的显微镜。其中扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)是比较常用的两类扫描探针显微镜。扫描隧道显微镜是通过检测探针与被测样品之间的隧道电流的大小来检测样品表面结构。原子力显微镜是通过光电位移传感器检测针尖一样品间的相...
透射电子显微镜和扫描电子显微镜两者用的都是电子作为发射源,不过透射电子显微镜的结构更像是我们看到的光学显微镜,即通过两次电子束的聚焦,然后经过样品,经过投影屏放大分析,得到样品的微观结构。但是扫描电子显微镜则没有后面用来放大的投影屏,而是接收屏,即电子打在样品上后激发产生的二次电子,也可以理解为“反射”。所以看到的TEM和SEM在图像成像上,前者看着极其扁平,如同光镜的图像,是一个平面。但是SEM获得的图像有纵深,看着像是3D图像。体视显微镜的光路设计;南昌motic 显微镜
共聚焦主要的观察对象是荧光。通俗来讲,是指用波长短的光照射某物质,该物质被照射时,由于光激发原理,能发射出比照射光波长较长的光,后者即为荧光。我们观察的荧光物质主要为荧光蛋白或荧光染料,可能样本本身也会有一些自发荧光。具体到共聚焦显微镜上,就是用不同的激光器去激发样本中的荧光染料,使之发射不同的荧光,就可以得到多色荧光图像了。不管是荧光染料还是荧光蛋白,或是其它荧光材料,都有其荧光特性,主要指激发光(Ex)-Excitation与发射光(Em)-Emission。我们常说的488,543,633就是指相关荧光材料的激发光,但要注意,无论激发光还是发射光,都不是一个数值,而是一段波谱,只是为了日常使用方便才使用488nm这样的波谱峰值(Ex-Max)。motic 显微镜厂家直销激光共聚焦显微镜不仅可以改善有效信号,而且可以降低噪声信号并获得高质量的荧光图像。
显微镜的观察方式,你知道几种?明场成像是常见的显微镜观察方式,也是观察生物样品和材料样品常用的观察方式。观察不透明的材料样品,反射光明场是使用较多的观察方式。光源直接照射到样品表面,表面的结构对照射光有不同程度的反射和吸收,图像的亮暗就反映样品表面的粗糙度和吸光情况。暗场成像与明场成像相对应,顾名思义,人不会直接观察到照明光线,而是光线斜射到标本的表面,根据丁道尔(Tyndall)现象,微粒对斜射光进行反射或衍射,增大了人眼可见性,我们才能够观察到极其微小的物体。相差也是一种很常见的观察方式,用来进行活细胞成像。由于细胞在明场下轮廓不清,虽然可以观察到,但其边界或内部结构无法分辨清楚。相差利用光程差(相位)这种人眼无法区分的技巧,光通过不同厚度标本时的光程差转变为人眼可以观察到的明暗变化,从而对标本的结构有了区分。
显微镜聚光镜
在照明系统中,聚光镜的作用是比较大限度地把光线聚集起来,投射到显微镜的成像系统中。基于聚光镜的功能,对聚光镜像质的要求为球差和色差,以和显微镜物镜的像差相适应。
显微镜色差
一般在设计时,只在可能条件下取得最小值即可,故聚光镜的选料很重要。聚光镜的材料宜选用低色散的光学玻璃(如K9玻璃)。由于位置色差在视场中叠加的结果是在其边缘出现彩色现象,只要使照明的区域大于标本的尺寸就能避免色差的影响。但是,对柯勒照明来说,要求聚光镜把它的光阑成像在物面上,避免色差影响以消色差聚光镜的方案替代了。消色差聚光镜的结构类似于高倍显微镜物镜,只是焦距比较长,以使光束能够通过较厚的载物玻璃(约2mm)照亮标本。
球差存在将影响聚光镜对光线的聚集能力,降低照明的效果。
显微镜的几种观察方式;
透射电子显微镜、扫描电子显微镜、扫描隧道显微镜和原子力显微镜是各个高科技领域经常运用的四种显微镜。英文名分别是Transmission Electron Microscope(TEM),Scanning Electron Mcroscope(SEM)、Scanning Tunneling Microscope(STM)和Atomic Force Microscope(AFM)。从名字中很容易知道四个显微镜的特点,其中TEM和SEM用的是电子来替代光,从而确定观测样品结构,而STM和AFM其实用的都是探针。所以可以认为亚显微级显微镜(这个名字主要是区别开光学显微镜,用来说明其分辨率远高于用可见光观测)可以分为两大类,即电子显微镜类别和探针显微镜类别。体视显微镜和视频显微镜。上海显微镜种类
视频显微镜和金像显微镜。南昌motic 显微镜
共聚焦显微镜技术下一步的研究重点应该集中在以下几点:1、更快的扫描速度目前共聚焦扫描速度受限于扫描设备的机械结构,要想获得更快的扫描速度只能牺(xi)牲分辨率。而很多生物过程非常迅速,目前仍然无法检测。2、更wan美的超高分辨率技术目前超高分辨率技术有STORM、PALM、STED和SSIM几种技术,分辨率从20~200nm不等,但是各种技术均有一定缺陷,例如在样品处理、Z轴方向、光毒性等方面还不近wan美,在实际观察中往往很难达到极限分辨率。3、更强的兼容性共聚焦显微镜技术涉及到多种激发方式,例如多光子和光片式观察,相干反斯托克斯拉曼散射在理论上可以公用一套激光系统。超高分辨率显微术可以搭配白激光技术。南昌motic 显微镜
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